DELLA ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਹਨ।ਵਿਕਾਸ ਰੈਗੂਲੇਟਰਜੋ ਅੰਦਰੂਨੀ ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਸੰਕੇਤਾਂ ਦੇ ਜਵਾਬ ਵਿੱਚ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਵਿੱਚ ਕੇਂਦਰੀ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨਲ ਰੈਗੂਲੇਟਰਾਂ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ, DELLA ਆਪਣੇ GRAS ਡੋਮੇਨਾਂ ਰਾਹੀਂ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਫੈਕਟਰਾਂ (TFs) ਅਤੇ ਹਿਸਟੋਨ H2A ਨਾਲ ਜੁੜਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰਮੋਟਰਾਂ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰਨ ਲਈ ਭਰਤੀ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਹਾਲੀਆ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ DELLA ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਅਨੁਵਾਦ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੋ ਵਿਧੀਆਂ ਦੁਆਰਾ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ: ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਹਾਰਮੋਨ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਪੌਲੀਯੂਬਿਕਿਟੀਨੇਸ਼ਨਗਿਬਰੇਲਿਨ, ਜੋ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਛੋਟੇ ਯੂਬੀਕਿਟਿਨ-ਵਰਗੇ ਮੋਡੀਫਾਇਰ (SUMO) ਨਾਲ ਸੰਯੋਜਨ, ਜੋ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਸੰਚਵ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, DELLA ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗਲਾਈਕੋਸਾਈਲੇਸ਼ਨ ਵਿਧੀਆਂ ਦੁਆਰਾ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ: O-ਫਿਊਕੋਸਾਈਲੇਸ਼ਨ DELLA-TF ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ O-ਲਿੰਕਡ N-ਐਸੀਟਿਲਗਲੂਕੋਸਾਮਾਈਨ (O-GlcNAc) ਸੋਧ DELLA-TF ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, DELLA ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ ਅਸਪਸ਼ਟ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਵਿਰੋਧੀ ਨਤੀਜੇ ਦਿਖਾਏ ਹਨ, ਕੁਝ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ DELLA ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਦਬਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਦੂਸਰੇ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇੱਥੇ, ਅਸੀਂ GA1-3 ਰੀਪ੍ਰੈਸਰ (RGA), AtDELLA ਵਿੱਚ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਸਾਈਟਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਦੇ ਹਾਂ, ਜੋ ਕਿ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ ਦੁਆਰਾ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਥਾਲੀਆਨਾ ਤੋਂ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ ਅਤੇ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ PolyS ਅਤੇ PolyS/T ਖੇਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਦੋ RGA ਪੇਪਟਾਇਡਾਂ ਦਾ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ H2A ਬਾਈਡਿੰਗ ਅਤੇ ਟਾਰਗੇਟ ਪ੍ਰਮੋਟਰਾਂ ਨਾਲ RGA ਸਬੰਧ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਕੇ RGA ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਨੇ RGA-TF ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਜਾਂ RGA ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ। ਸਾਡਾ ਅਧਿਐਨ ਇੱਕ ਅਣੂ ਵਿਧੀ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਦੁਆਰਾ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ DELLA ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ।
ਸਾਡੇ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟ੍ਰਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਾ ਹੈ ਕਿ GA-ਘਾਟ ਵਾਲੇ Ga1 ਪਿਛੋਕੜ ਵਿੱਚ RGA ਵਿੱਚ Pep1 ਅਤੇ Pep2 ਦੋਵੇਂ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਸਨ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਫਾਸਫੋਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ RGA ਵਿੱਚ Pep1 ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਦਾ ਵੀ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ ਹੈ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਇਸਦੀ ਭੂਮਿਕਾ ਦਾ ਅਜੇ ਤੱਕ ਅਧਿਐਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ53,54,55। ਇਸਦੇ ਉਲਟ, Pep2 ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਦਾ ਪਹਿਲਾਂ ਵਰਣਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਇਸ ਪੇਪਟਾਈਡ ਨੂੰ ਸਿਰਫ RGAGKG ਟ੍ਰਾਂਸਜੀਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਸੀ। ਹਾਲਾਂਕਿ m1A ਪਰਿਵਰਤਨ, ਜਿਸਨੇ Pep1 ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰ ਦਿੱਤਾ, ਨੇ ਪਲਾਂਟਾ ਵਿੱਚ RGA ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਥੋੜ੍ਹਾ ਜਿਹਾ ਘਟਾਇਆ, ਇਸਦਾ RGA ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਵਿੱਚ m2A ਨਾਲ ਜੋੜਨ 'ਤੇ ਇੱਕ ਜੋੜ ਪ੍ਰਭਾਵ ਸੀ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 6)। ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ, ga1 ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ GA-ਵਧਾਇਆ sly1 ਮਿਊਟੈਂਟ ਵਿੱਚ Pep1 ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਨੂੰ ਕਾਫ਼ੀ ਘੱਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ ਕਿ GA RGA ਡੀਫੋਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਇਸਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਜਿਸ ਵਿਧੀ ਦੁਆਰਾ GA RGA ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਨੂੰ ਦਬਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਉਸ ਲਈ ਹੋਰ ਜਾਂਚ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ। ਇੱਕ ਸੰਭਾਵਨਾ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਇੱਕ ਅਣਪਛਾਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਕਿਨੇਜ਼ ਦੇ ਨਿਯਮ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਚੌਲਾਂ ਵਿੱਚ GA ਦੁਆਰਾ CK1 ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਕਿਨੇਜ਼ EL1 ਦੀ ਸਮੀਕਰਨ ਨੂੰ ਘਟਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ41, ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ EL1 ਹੋਮੋਲੋਗ (AEL1-4) ਦੇ ਉੱਚ-ਕ੍ਰਮ ਪਰਿਵਰਤਨ RGA ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਘੱਟ ਨਹੀਂ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਸਾਡੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਸਹਿਮਤ, ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ AEL ਓਵਰਐਕਸਪ੍ਰੈਸਿੰਗ ਲਾਈਨਾਂ ਅਤੇ ਇੱਕ ਏਈਐਲ ਟ੍ਰਿਪਲ ਮਿਊਟੈਂਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਹਾਲੀਆ ਫਾਸਫੋਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਇਹਨਾਂ ਕਿਨੇਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸਬਸਟਰੇਟ ਵਜੋਂ ਕਿਸੇ ਵੀ DELLA ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਪਛਾਣ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ56। ਜਦੋਂ ਅਸੀਂ ਹੱਥ-ਲਿਖਤ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀ, ਤਾਂ ਇਹ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਗਈ ਕਿ GSK3, ਕਣਕ ਵਿੱਚ GSK3/SHAGGY-ਵਰਗੇ ਕਿਨੇਜ਼ ਨੂੰ ਏਨਕੋਡ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਜੀਨ (ਟ੍ਰਾਈਟਿਕਮ ਐਸਟੀਵਮ), DELLA (Rht-B1b)57 ਨੂੰ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਹਾਲਾਂਕਿ GSK3 ਦੁਆਰਾ Rht-B1b ਦੇ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਪਲਾਂਟਾ ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ। GSK3 ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਇਨ ਵਿਟਰੋ ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ Rht-B1b ਦੇ DELLA ਅਤੇ GRAS ਡੋਮੇਨਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਸਥਿਤ ਤਿੰਨ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਸਾਈਟਾਂ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 3)। ਤਿੰਨੋਂ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਸਾਈਟਾਂ 'ਤੇ ਸੀਰੀਨ ਤੋਂ ਐਲਾਨਾਈਨ ਬਦਲਾਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਟ੍ਰਾਂਸਜੈਨਿਕ ਕਣਕ ਵਿੱਚ Rht-B1b ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਆਈ, ਜੋ ਕਿ ਸਾਡੇ ਖੋਜਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹੈ ਕਿ Pep2 RGA ਵਿੱਚ ਐਲਾਨਾਈਨ ਬਦਲਾਂ ਨੇ RGA ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਨ ਵਿਟਰੋ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਅਸੈਸ ਨੇ ਅੱਗੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ Rht-B1b57 ਨੂੰ ਵੀ ਸਥਿਰ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਸਾਡੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਉਲਟ ਹੈ ਜੋ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ Pep2 RGA ਵਿੱਚ ਐਲਾਨਾਈਨ ਬਦਲਾਂ ਪਲਾਂਟਾ ਵਿੱਚ ਇਸਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਨਹੀਂ ਬਦਲਦੀਆਂ। ਕਣਕ ਵਿੱਚ GSK3 ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ 57 ਵਿੱਚ ਬ੍ਰਾਸਿਨੋਸਟੇਰਾਇਡ-ਅਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ 2 (BIN2) ਦਾ ਇੱਕ ਆਰਥੋਲੋਗ ਹੈ। BIN2 BR ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਦਾ ਇੱਕ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਰੈਗੂਲੇਟਰ ਹੈ, ਅਤੇ BR BIN2 ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ 58 ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਕੇ ਇਸਦੇ ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਮਾਰਗ ਨੂੰ ਸਰਗਰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਅਸੀਂ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ BR ਇਲਾਜ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 2) ਵਿੱਚ RGA ਸਥਿਰਤਾ 59 ਜਾਂ ਫਾਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਪੱਧਰਾਂ ਨੂੰ ਨਹੀਂ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ ਕਿ RGA ਦੇ BIN2 ਦੁਆਰਾ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟ ਹੋਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਨਹੀਂ ਹੈ।
ਸਾਰੇ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਡੇਟਾ ਦਾ ਐਕਸਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਅੰਕੜਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਦੇ ਟੀ-ਟੈਸਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕੋਈ ਅੰਕੜਾਤਮਕ ਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤੋਂ ਕੋਈ ਡੇਟਾ ਬਾਹਰ ਨਹੀਂ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ; ਪ੍ਰਯੋਗ ਨੂੰ ਬੇਤਰਤੀਬ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ; ਅਤੇ ਖੋਜਕਰਤਾ ਪ੍ਰਯੋਗ ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਦੌਰਾਨ ਵੰਡ ਤੋਂ ਜਾਣੂ ਸਨ। ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਆਕਾਰ ਚਿੱਤਰ ਦੰਤਕਥਾਵਾਂ ਅਤੇ ਕੱਚੇ ਡੇਟਾ ਫਾਈਲਾਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।
ਪੋਸਟ ਸਮਾਂ: ਅਪ੍ਰੈਲ-15-2025