ਪਾਈਨ ਦੇ ਨੇਮਾਟੋਡ ਰੋਗ ਦੇ ਪ੍ਰੇਰਕ ਵਜੋਂ ਆਇਓਡੀਨ ਅਤੇ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ

ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡ ਇੱਕ ਕੁਆਰੰਟੀਨ ਮਾਈਗ੍ਰੇਟਰੀ ਐਂਡੋਪਰਾਸਾਈਟ ਹੈ ਜੋ ਪਾਈਨ ਜੰਗਲ ਦੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਵਿੱਚ ਗੰਭੀਰ ਆਰਥਿਕ ਨੁਕਸਾਨ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ। ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਦੀ ਨੇਮਾਟੋਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਿਧੀ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ (ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ) ਦੀਆਂ ਨੇਮਾਟੋਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਘੱਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (10 μg/mL) 'ਤੇ ਸਮਾਨ ਅਤੇ ਉੱਚ ਸਨ। 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਨੇ ਉਪਜਾਊ ਸ਼ਕਤੀ, ਪ੍ਰਜਨਨ ਗਤੀਵਿਧੀ, ਭਰੂਣ ਅਤੇ ਲਾਰਵਾ ਮੌਤ ਦਰ, ਅਤੇ ਲੋਕੋਮੋਟਰ ਵਿਵਹਾਰ ਨੂੰ ਘਟਾਇਆ। ਇਨਵਰਟੇਬ੍ਰੇਟ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਗਲੂਟਾਮੇਟ-ਗੇਟਿਡ ਕਲੋਰਾਈਡ ਚੈਨਲ ਰੀਸੈਪਟਰਾਂ ਨਾਲ ਲਿਗੈਂਡਸ ਦੇ ਅਣੂ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਇਸ ਧਾਰਨਾ ਦਾ ਸਮਰਥਨ ਕਰਦੇ ਹਨ ਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ, ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਵਾਂਗ, ਰੀਸੈਪਟਰ ਸਰਗਰਮ ਸਾਈਟ ਨਾਲ ਕੱਸ ਕੇ ਜੁੜਦਾ ਹੈ। 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਨੇ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਵਿੱਚ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪਿਕ ਵਿਗਾੜਾਂ ਨੂੰ ਵੀ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕੀਤਾ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਅਸਧਾਰਨ ਅੰਗ ਢਹਿਣਾ/ਸੁੰਗੜਨਾ ਅਤੇ ਵਧਿਆ ਹੋਇਆ ਵੈਕਿਊਲਾਈਜੇਸ਼ਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਵੈਕਿਊਲ ਨੇਮਾਟੋਡ ਮਿਥਾਈਲੇਸ਼ਨ-ਵਿਚੋਲਗੀ ਮੌਤ ਵਿੱਚ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾ ਸਕਦੇ ਹਨ। ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀਆਂ ਕਿਸਮਾਂ (ਗੋਭੀ ਅਤੇ ਮੂਲੀ) ਦੋਵਾਂ ਲਈ ਗੈਰ-ਜ਼ਹਿਰੀਲਾ ਸੀ। ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪਾਈਨ ਵਿਲਟ ਦੀ ਸੱਟ ਨੂੰ ਕੰਟਰੋਲ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਪਾਈਨ ਵੁੱਡ ਨੇਮਾਟੋਡ (ਬਰਸਾਫੇਲੇਨਚਸ ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ) ਪਾਈਨ ਵੁੱਡ ਨੇਮਾਟੋਡ (PWN) ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ, ਪ੍ਰਵਾਸੀ ਐਂਡੋਪੈਰਾਸੀਟਿਕ ਨੇਮਾਟੋਡ ਜੋ ਪਾਈਨ ਜੰਗਲ ਦੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਨੂੰ ਗੰਭੀਰ ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਾਉਣ ਲਈ ਜਾਣੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ1। ਪਾਈਨ ਵੁੱਡ ਨੇਮਾਟੋਡ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੀ ਪਾਈਨ ਵਿਲਟ ਬਿਮਾਰੀ (PWD) ਏਸ਼ੀਆ ਅਤੇ ਯੂਰਪ ਸਮੇਤ ਕਈ ਮਹਾਂਦੀਪਾਂ 'ਤੇ ਇੱਕ ਗੰਭੀਰ ਸਮੱਸਿਆ ਬਣਦੀ ਜਾ ਰਹੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਉੱਤਰੀ ਅਮਰੀਕਾ ਵਿੱਚ, ਨੇਮਾਟੋਡ ਸ਼ੁਰੂ ਕੀਤੀਆਂ ਪਾਈਨ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਨੂੰ ਨਸ਼ਟ ਕਰ ਦਿੰਦਾ ਹੈ1,2। ਪਾਈਨ ਦੇ ਰੁੱਖਾਂ ਦੀ ਗਿਰਾਵਟ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਆਰਥਿਕ ਸਮੱਸਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਵਿਸ਼ਵਵਿਆਪੀ ਫੈਲਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਚਿੰਤਾਜਨਕ ਹੈ3। ਹੇਠ ਲਿਖੀਆਂ ਪਾਈਨ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ 'ਤੇ ਨੇਮਾਟੋਡ ਦੁਆਰਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਹਮਲਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ: ਪਿਨਸ ਡੈਨਸੀਫਲੋਰਾ, ਪਿਨਸ ਸਿਲਵੇਸਟ੍ਰਿਸ, ਪਿਨਸ ਥਨਬਰਗੀ, ਪਿਨਸ ਕੋਰੇਏਨਸਿਸ, ਪਿਨਸ ਥਨਬਰਗੀ, ਪਿਨਸ ਥਨਬਰਗੀ, ਅਤੇ ਪਿਨਸ ਰੇਡੀਆਟਾ4। ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡ ਇੱਕ ਗੰਭੀਰ ਬਿਮਾਰੀ ਹੈ ਜੋ ਲਾਗ ਦੇ ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਜਾਂ ਮਹੀਨਿਆਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਪਾਈਨ ਦੇ ਰੁੱਖਾਂ ਨੂੰ ਮਾਰ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡ ਦਾ ਪ੍ਰਕੋਪ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਵਿੱਚ ਆਮ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਲਗਾਤਾਰ ਇਨਫੈਕਸ਼ਨ ਚੇਨ ਸਥਾਪਤ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ1।
ਬਰਸਾਫੇਲੇਂਚਸ ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ ਇੱਕ ਕੁਆਰੰਟੀਨ ਪੌਦਾ-ਪਰਜੀਵੀ ਨੇਮਾਟੋਡ ਹੈ ਜੋ ਸੁਪਰਫੈਮਲੀ ਐਫੇਲੇਨਕੋਇਡੀਆ ਅਤੇ ਕਲੇਡ 102.5 ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ। ਨੇਮਾਟੋਡ ਫੰਜਾਈ ਨੂੰ ਖਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪਾਈਨ ਦੇ ਰੁੱਖਾਂ ਦੇ ਲੱਕੜ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਜਨਨ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਚਾਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਲਾਰਵਾ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ: L1, L2, L3, L4 ਅਤੇ ਇੱਕ ਬਾਲਗ ਵਿਅਕਤੀ1,6। ਭੋਜਨ ਦੀ ਘਾਟ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ, ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਲਾਰਵਾ ਪੜਾਅ - ਡੌਅਰ ਵਿੱਚ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਇਸਦੇ ਵੈਕਟਰ - ਪਾਈਨ ਸੱਕ ਬੀਟਲ (ਮੋਨੋਚੈਮਸ ਅਲਟਰਨੇਟਸ) ਨੂੰ ਪਰਜੀਵੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸਿਹਤਮੰਦ ਪਾਈਨ ਦੇ ਰੁੱਖਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਸਿਹਤਮੰਦ ਮੇਜ਼ਬਾਨਾਂ ਵਿੱਚ, ਨੇਮਾਟੋਡ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਰਾਹੀਂ ਪ੍ਰਵਾਸ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਪੈਰੇਨਕਾਈਮੇਟਸ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਖਾਂਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਲਾਗ 1,7,8 ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇੱਕ ਸਾਲ ਦੇ ਅੰਦਰ ਕਈ ਅਤਿ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ, ਪਾਈਨ ਮੁਰਝਾ ਜਾਣਾ ਅਤੇ ਮੌਤ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਦਾ ਜੈਵਿਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਤੋਂ ਇੱਕ ਚੁਣੌਤੀ ਰਿਹਾ ਹੈ, 20ਵੀਂ ਸਦੀ ਤੋਂ ਕੁਆਰੰਟੀਨ ਉਪਾਅ ਕੀਤੇ ਜਾ ਰਹੇ ਹਨ। ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਨੂੰ ਕੰਟਰੋਲ ਕਰਨ ਲਈ ਮੌਜੂਦਾ ਰਣਨੀਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰਸਾਇਣਕ ਇਲਾਜ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਲੱਕੜ ਦੀ ਧੁੰਦ ਅਤੇ ਰੁੱਖਾਂ ਦੇ ਤਣਿਆਂ ਵਿੱਚ ਨੇਮਾਟੀਸਾਈਡਾਂ ਦਾ ਇਮਪਲਾਂਟੇਸ਼ਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ। ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਨੇਮਾਟੀਸਾਈਡ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਅਤੇ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਬੈਂਜੋਏਟ ਹਨ, ਜੋ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਪਰਿਵਾਰ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹਨ। ਇਹ ਮਹਿੰਗੇ ਰਸਾਇਣ ਕਈ ਨੇਮਾਟੋਡ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਬਹੁਤ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਹਨ ਅਤੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਮੰਨੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ9। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਹਨਾਂ ਨੇਮਾਟੀਸਾਈਡਾਂ ਦੀ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਵਰਤੋਂ ਨਾਲ ਚੋਣ ਦਬਾਅ ਪੈਦਾ ਹੋਣ ਦੀ ਉਮੀਦ ਹੈ ਜੋ ਲਗਭਗ ਨਿਸ਼ਚਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰੋਧਕ ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਦੇ ਉਭਾਰ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਵੇਗਾ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕਈ ਕੀਟ-ਕੀਟਾਂ ਲਈ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੇਪਟੀਨੋਟਾਰਸਾ ਡੇਸੇਮਲਾਈਨਾਟਾ, ਪਲੂਟੇਲਾ ਜ਼ਾਈਲੋਸਟੇਲਾ ਅਤੇ ਨੇਮਾਟੋਡ ਟ੍ਰਾਈਕੋਸਟ੍ਰੋਂਗਾਇਲਸ ਕੋਲੂਬਰੀਫਾਰਮਿਸ ਅਤੇ ਓਸਟਰਟੈਜੀਆ ਸਰਕਮਸਿਨਕਟਾ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ 10,11,12 ਪ੍ਰਤੀ ਵਿਰੋਧ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ, ਪੀਵੀਡੀ ਨੂੰ ਕੰਟਰੋਲ ਕਰਨ ਲਈ ਵਿਕਲਪਕ, ਲਾਗਤ-ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਅਤੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਅਨੁਕੂਲ ਉਪਾਅ ਲੱਭਣ ਲਈ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧ ਪੈਟਰਨਾਂ ਦਾ ਨਿਯਮਿਤ ਤੌਰ 'ਤੇ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਅਤੇ ਨੇਮੇਟਿਕਸ ਦੀ ਲਗਾਤਾਰ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ। ਹਾਲ ਹੀ ਦੇ ਦਹਾਕਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਕਈ ਲੇਖਕਾਂ ਨੇ ਨੇਮਾਟੋਡ ਕੰਟਰੋਲ ਏਜੰਟਾਂ 13,14,15,16 ਵਜੋਂ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਅਰਕ, ਜ਼ਰੂਰੀ ਤੇਲਾਂ ਅਤੇ ਅਸਥਿਰ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਰੱਖਿਆ ਹੈ।
ਅਸੀਂ ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ ਕੈਨੋਰਹੈਬਡਾਈਟਿਸ ਐਲੀਗਨਸ 17 ਵਿੱਚ ਇੰਡੋਲ, ਇੱਕ ਇੰਟਰਸੈਲੂਲਰ ਅਤੇ ਇੰਟਰਕਿੰਗਡਮ ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਅਣੂ, ਦੀ ਨੇਮੇਟਿਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਹੈ। ਇੰਡੋਲ ਮਾਈਕਰੋਬਾਇਲ ਈਕੋਲੋਜੀ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਿਆਪਕ ਇੰਟਰਸੈਲੂਲਰ ਸਿਗਨਲ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਮਾਈਕਰੋਬਾਇਲ ਫਿਜ਼ੀਓਲੋਜੀ, ਸਪੋਰ ਗਠਨ, ਪਲਾਜ਼ਮਿਡ ਸਥਿਰਤਾ, ਡਰੱਗ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧ, ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਗਠਨ, ਅਤੇ ਵਾਇਰਲੈਂਸ 18, 19 ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਕਈ ਕਾਰਜਾਂ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਹੋਰ ਰੋਗਾਣੂ ਨੈਮਾਟੋਡਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਪਾਈਨ ਨੈਮਾਟੋਡਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ 34 ਇੰਡੋਲਾਂ ਦੀ ਨੇਮੇਟਿਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ, ਟਾਈਮ-ਲੈਪਸ ਫੋਟੋਗ੍ਰਾਫੀ, ਅਤੇ ਅਣੂ ਡੌਕਿੰਗ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਸਭ ਤੋਂ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਸਪੱਸ਼ਟ ਕੀਤਾ, ਅਤੇ ਬੀਜ ਉਗਣ ਦੀ ਜਾਂਚ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪੌਦਿਆਂ 'ਤੇ ਇਸਦੇ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ।
ਇੰਡੋਲ ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (>1.0 mM) ਪਹਿਲਾਂ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ 'ਤੇ ਨੇਮਾਟਿਸਾਈਡਲ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪਾਉਣ ਦੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ17। ਬੀ. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ (ਮਿਸ਼ਰਤ ਜੀਵਨ ਪੜਾਅ) ਦੇ ਇੰਡੋਲ ਜਾਂ 33 ਵੱਖ-ਵੱਖ ਇੰਡੋਲ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਨਾਲ 1 mM 'ਤੇ ਇਲਾਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਬੀ. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ ਦੀ ਮੌਤ ਦਰ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਜੀਵਿਤ ਅਤੇ ਮਰੇ ਹੋਏ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ। ਪੰਜ ਇੰਡੋਲਾਂ ਨੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨੇਮਾਟਿਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ; ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਕੰਟਰੋਲ ਸਮੂਹ ਦਾ ਬਚਾਅ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਬਾਅਦ 95 ± 7% ਸੀ। ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਗਏ 34 ਇੰਡੋਲਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, 1 mM 'ਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਅਤੇ 4-ਫਲੋਰੋਇੰਡੋਲ ਨੇ 100% ਮੌਤ ਦਰ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਾਇਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ 5,6-ਡਾਈਫਲੂਓਰੋਇੰਡੀਗੋ, ਮਿਥਾਈਲਇੰਡੋਲ-7-ਕਾਰਬੋਕਸੀਲੇਟ, ਅਤੇ 7-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਨੇ ਲਗਭਗ 50% ਮੌਤ ਦਰ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਾਇਆ (ਸਾਰਣੀ 1)।
5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਪਾਈਨ ਵੁੱਡ ਨੇਮਾਟੋਡ ਦੇ ਵੈਕਿਊਲ ਗਠਨ ਅਤੇ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ। (A) ਬਾਲਗ ਨਰ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ 'ਤੇ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਅਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ, (B) L1 ਸਟੇਜ ਨੇਮਾਟੋਡ ਅੰਡੇ ਅਤੇ (C) ਬੀ. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ ਦਾ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ, (i) 0 ਘੰਟਿਆਂ 'ਤੇ ਵੈਕਿਊਲ ਨਹੀਂ ਦੇਖੇ ਗਏ, ਇਲਾਜ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ (ii) ਵੈਕਿਊਲ, (iii) ਮਲਟੀਪਲ ਵੈਕਿਊਲ ਇਕੱਠੇ ਹੋਏ, (iv) ਵੈਕਿਊਲ ਦੀ ਸੋਜ, (v) ਵੈਕਿਊਲ ਦਾ ਫਿਊਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ (vi) ਵਿਸ਼ਾਲ ਵੈਕਿਊਲ ਬਣ ਗਏ। ਲਾਲ ਤੀਰ ਵੈਕਿਊਲ ਦੀ ਸੋਜ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਨੀਲੇ ਤੀਰ ਵੈਕਿਊਲ ਦੇ ਫਿਊਲ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਾਲੇ ਤੀਰ ਵਿਸ਼ਾਲ ਵੈਕਿਊਲ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 50 μm।
ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਵਿੱਚ ਮੀਥੇਨ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਮੌਤ ਦੀ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਵੀ ਵਰਣਨ ਕੀਤਾ ਹੈ (ਚਿੱਤਰ 4C)। ਮੀਥੇਨੋਜੈਨਿਕ ਮੌਤ ਇੱਕ ਗੈਰ-ਅਪੋਪਟੋਟਿਕ ਕਿਸਮ ਦੀ ਸੈੱਲ ਮੌਤ ਹੈ ਜੋ ਪ੍ਰਮੁੱਖ ਸਾਇਟੋਪਲਾਜ਼ਮਿਕ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਦੇ ਇਕੱਠੇ ਹੋਣ ਨਾਲ ਜੁੜੀ ਹੋਈ ਹੈ27। ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਵਿੱਚ ਦੇਖੇ ਗਏ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨਿਕ ਨੁਕਸ ਮੀਥੇਨ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਮੌਤ ਦੇ ਵਿਧੀ ਨਾਲ ਨੇੜਿਓਂ ਸਬੰਧਤ ਜਾਪਦੇ ਹਨ। ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਮਿਆਂ 'ਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪਿਕ ਜਾਂਚ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਵਿਸ਼ਾਲ ਵੈਕਿਊਲਾਂ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (0.1 mM) ਦੇ ਸੰਪਰਕ ਦੇ 20 ਘੰਟੇ ਬਾਅਦ ਬਣੀਆਂ ਸਨ। ਇਲਾਜ ਦੇ 8 ਘੰਟੇ ਬਾਅਦ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪਿਕ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਦੇਖੇ ਗਏ, ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ 12 ਘੰਟੇ ਬਾਅਦ ਵਧ ਗਈ। 14 ਘੰਟੇ ਬਾਅਦ ਕਈ ਵੱਡੇ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਦੇਖੇ ਗਏ। ਇਲਾਜ ਦੇ 12-16 ਘੰਟੇ ਬਾਅਦ ਕਈ ਫਿਊਜ਼ਡ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਸਪੱਸ਼ਟ ਤੌਰ 'ਤੇ ਦਿਖਾਈ ਦੇ ਰਹੀਆਂ ਸਨ, ਜੋ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ ਕਿ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਦਾ ਫਿਊਜ਼ਨ ਮੀਥੇਨੋਜੈਨਿਕ ਮੌਤ ਵਿਧੀ ਦਾ ਆਧਾਰ ਹੈ। 20 ਘੰਟਿਆਂ ਬਾਅਦ, ਪੂਰੇ ਕੀੜੇ ਵਿੱਚ ਕਈ ਵਿਸ਼ਾਲ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਮਿਲੀਆਂ। ਇਹ ਨਿਰੀਖਣ ਸੀ. ਐਲੀਗਨਜ਼ ਵਿੱਚ ਮੈਟਿਓਸਿਸ ਦੀ ਪਹਿਲੀ ਰਿਪੋਰਟ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।
5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਕੀੜਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਵੈਕਿਊਲ ਇਕੱਠਾ ਹੋਣਾ ਅਤੇ ਫਟਣਾ ਵੀ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ (ਚਿੱਤਰ 5), ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕੀੜੇ ਦੇ ਝੁਕਣ ਅਤੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਵਿੱਚ ਵੈਕਿਊਲ ਛੱਡਣ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਹੈ। ਅੰਡੇ ਦੇ ਸ਼ੈੱਲ ਝਿੱਲੀ ਵਿੱਚ ਵੈਕਿਊਲ ਵਿਘਨ ਵੀ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ, ਜਿਸਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਹੈਚਿੰਗ ਦੌਰਾਨ L2 ਦੁਆਰਾ ਬਰਕਰਾਰ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S2)। ਇਹ ਨਿਰੀਖਣ ਵੈਕਿਊਲ ਗਠਨ ਅਤੇ ਸਪਿਊਰੇਸ਼ਨ (ਚਿੱਤਰ 5) ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਤਰਲ ਇਕੱਠਾ ਹੋਣ ਅਤੇ ਓਸਮੋਰੇਗੁਲੇਟਰੀ ਅਸਫਲਤਾ, ਅਤੇ ਨਾਲ ਹੀ ਉਲਟਾਉਣ ਯੋਗ ਸੈੱਲ ਸੱਟ (RCI) ਦੀ ਸ਼ਮੂਲੀਅਤ ਦਾ ਸਮਰਥਨ ਕਰਦੇ ਹਨ।
ਦੇਖੇ ਗਏ ਵੈਕਿਊਲ ਗਠਨ ਵਿੱਚ ਆਇਓਡੀਨ ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ ਦੀ ਕਲਪਨਾ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਅਸੀਂ ਸੋਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (NaI) ਅਤੇ ਪੋਟਾਸ਼ੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (KI) ਦੀ ਨੇਮੇਟਿਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0.1, 0.5 ਜਾਂ 1 mM) 'ਤੇ, ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਨੇਮਾਟੋਡ ਦੇ ਬਚਾਅ ਜਾਂ ਵੈਕਿਊਲ ਗਠਨ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S5) ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ, ਹਾਲਾਂਕਿ 1 mM KI ਦਾ ਥੋੜ੍ਹਾ ਜਿਹਾ ਨੇਮੇਟਿਸਾਈਡਲ ਪ੍ਰਭਾਵ ਸੀ। ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, 7-ਆਇਓਡਾਇੰਡੋਲ (1 ਜਾਂ 2 mM), 5-ਆਇਓਡਾਇੰਡੋਲ ਵਾਂਗ, ਕਈ ਵੈਕਿਊਲ ਅਤੇ ਢਾਂਚਾਗਤ ਵਿਗਾੜਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕੀਤਾ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S6)। ਦੋ ਆਇਓਡਾਇੰਡੋਲਾਂ ਨੇ ਪਾਈਨ ਨੈਮਾਟੋਡਾਂ ਵਿੱਚ ਸਮਾਨ ਫੀਨੋਟਾਈਪਿਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦਿਖਾਈਆਂ, ਜਦੋਂ ਕਿ NaI ਅਤੇ KI ਨੇ ਨਹੀਂ ਦਿਖਾਈਆਂ। ਦਿਲਚਸਪ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਇੰਡੋਲ ਨੇ ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ B. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ ਵਿੱਚ ਵੈਕਿਊਲ ਗਠਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ (ਡੇਟਾ ਨਹੀਂ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ)। ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੇ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ ਕਿ ਇੰਡੋਲ-ਆਇਓਡਾਈਨ ਕੰਪਲੈਕਸ B. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ ਦੇ ਵੈਕਿਊਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਲਈ ਜ਼ਿੰਮੇਵਾਰ ਹੈ।
ਨੇਮੇਟਿਸਾਈਡਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਲਈ ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਇੰਡੋਲਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਲਿੱਪ ਇੰਡੈਕਸ -5.89 kcal/mol ਸੀ, ਇਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 7-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (-4.48 kcal/mol), 4-ਫਲੋਰੋਇੰਡੋਲ (-4.33), ਅਤੇ ਇੰਡੋਲ (-4.03) (ਚਿੱਤਰ 6) ਹੈ। 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਲਿਊਸੀਨ 218 ਨਾਲ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਬੈਕਬੋਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬੰਧਨ ਇਸਦੇ ਬੰਧਨ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਹੋਰ ਸਾਰੇ ਇੰਡੋਲ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਸਾਈਡ ਚੇਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡਾਂ ਰਾਹੀਂ ਸੀਰੀਨ 260 ਨਾਲ ਜੁੜਦੇ ਹਨ। ਹੋਰ ਮਾਡਲ ਕੀਤੇ ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, 2-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਬਾਈਡਿੰਗ ਮੁੱਲ -5.248 kcal/mol ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਇਸਦੇ ਮੁੱਖ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੈ ਲਿਊਸੀਨ 218 ਨਾਲ। ਹੋਰ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਬਾਈਡਿੰਗਾਂ ਵਿੱਚ 3-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (-4.3 kcal/mol), 4-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (-4.0 kcal/mol), ਅਤੇ 6-ਫਲੋਰੋਇੰਡੋਲ (-2.6 kcal/mol) (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S8) ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਇੰਡੋਲ ਖੁਦ, 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਅਤੇ 2-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਨੂੰ ਛੱਡ ਕੇ, ਸੀਰੀਨ 260 ਨਾਲ ਇੱਕ ਬੰਧਨ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਇਹ ਤੱਥ ਕਿ ਲਿਊਸੀਨ 218 ਨਾਲ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬੰਧਨ ਕੁਸ਼ਲ ਰੀਸੈਪਟਰ-ਲਿਗੈਂਡ ਬਾਈਡਿੰਗ ਦਾ ਸੰਕੇਤ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਆਈਵਰਮੇਕਟਿਨ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S7) ਲਈ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਇਸ ਗੱਲ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਦਾ ਹੈ ਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਅਤੇ 2-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ, ਆਈਵਰਮੇਕਟਿਨ ਵਾਂਗ, ਲਿਊਸੀਨ 218 (ਚਿੱਤਰ 6 ਅਤੇ ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S8) ਰਾਹੀਂ ਗਲੂਸੀਐਲ ਰੀਸੈਪਟਰ ਦੀ ਸਰਗਰਮ ਸਾਈਟ ਨਾਲ ਕੱਸ ਕੇ ਬੰਨ੍ਹਦੇ ਹਨ। ਅਸੀਂ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਦਿੰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਇਹ ਬੰਧਨ ਗਲੂਸੀਐਲ ਕੰਪਲੈਕਸ ਦੇ ਖੁੱਲ੍ਹੇ ਪੋਰ ਢਾਂਚੇ ਨੂੰ ਬਣਾਈ ਰੱਖਣ ਲਈ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹੈ ਅਤੇ ਗਲੂਸੀਐਲ ਰੀਸੈਪਟਰ, 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ, 2-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ, ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਅਤੇ ਆਈਵਰਮੇਕਟਿਨ ਦੀ ਸਰਗਰਮ ਸਾਈਟ ਨਾਲ ਕੱਸ ਕੇ ਬੰਨ੍ਹ ਕੇ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਆਇਨ ਚੈਨਲ ਨੂੰ ਖੁੱਲ੍ਹਾ ਰੱਖਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਤਰਲ ਪਦਾਰਥਾਂ ਨੂੰ ਗ੍ਰਹਿਣ ਕਰਨ ਦਿੰਦੇ ਹਨ।
ਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਦਾ GluCL ਨਾਲ ਅਣੂ ਡੌਕਿੰਗ। (A) ਇੰਡੋਲ, (B) 4-ਫਲੂਰੋਇੰਡੋਲ, (C) 7-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ, ਅਤੇ (D) 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਲਿਗੈਂਡਸ ਦੇ GluCL ਦੇ ਸਰਗਰਮ ਸਥਾਨ ਨਾਲ ਜੋੜਨ ਵਾਲੇ ਦਿਸ਼ਾ-ਨਿਰਦੇਸ਼। ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਇੱਕ ਰਿਬਨ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਰੀੜ੍ਹ ਦੀ ਹੱਡੀ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਪੀਲੇ ਬਿੰਦੀਆਂ ਵਾਲੀਆਂ ਲਾਈਨਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। (A′), (B′), (C′), ਅਤੇ (D′) ਆਲੇ ਦੁਆਲੇ ਦੇ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਅਵਸ਼ੇਸ਼ਾਂ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਲਿਗੈਂਡਸ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਸਾਈਡ-ਚੇਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਗੁਲਾਬੀ ਬਿੰਦੀਆਂ ਵਾਲੇ ਤੀਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ।
ਗੋਭੀ ਅਤੇ ਮੂਲੀ ਦੇ ਬੀਜਾਂ ਦੇ ਉਗਣ 'ਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੇ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗ ਕੀਤੇ ਗਏ। 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (0.05 ਜਾਂ 0.1 ਮਿਲੀਮੀਟਰ) ਜਾਂ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ (10 μg/mL) ਦਾ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਉਗਣ ਅਤੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਉਗਣ 'ਤੇ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਜਾਂ ਕੋਈ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨਹੀਂ ਪਿਆ (ਚਿੱਤਰ 7)। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਲਾਜ ਨਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਅਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਜਾਂ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਬੀਜਾਂ ਦੀ ਉਗਣ ਦਰ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਨਹੀਂ ਪਾਇਆ ਗਿਆ। ਟੇਪਰੂਟ ਲੰਬਾਈ ਅਤੇ ਬਣੀਆਂ ਲੇਟਰਲ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਮਾਮੂਲੀ ਸੀ, ਹਾਲਾਂਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੇ 1 ਮਿਲੀਮੀਟਰ (ਇਸਦੀ ਸਰਗਰਮ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦਾ 10 ਗੁਣਾ) ਨੇ ਲੇਟਰਲ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਵਿੱਚ ਥੋੜ੍ਹਾ ਦੇਰੀ ਕੀਤੀ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਲਈ ਗੈਰ-ਜ਼ਹਿਰੀਲਾ ਹੈ ਅਤੇ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਘਨ ਨਹੀਂ ਪਾਉਂਦਾ।
ਬੀਜ ਦੇ ਉਗਣ 'ਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ। ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਜਾਂ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਬਿਨਾਂ ਮੁਰਾਸ਼ੀਗੇ ਅਤੇ ਸਕੂਗ ਅਗਰ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਬੀ. ਓਲੇਰੇਸੀਆ ਅਤੇ ਆਰ. ਰੈਫਨੀਸਟ੍ਰਮ ਬੀਜਾਂ ਦਾ ਉਗਣ, ਫੁੱਟਣਾ ਅਤੇ ਪਾਸੇ ਵੱਲ ਜੜ੍ਹਾਂ। 22°C 'ਤੇ 3 ਦਿਨਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਉਗਣ ਦਰਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।
ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਇੰਡੋਲਸ ਦੁਆਰਾ ਨੇਮਾਟੋਡ ਨੂੰ ਮਾਰਨ ਦੇ ਕਈ ਮਾਮਲਿਆਂ ਦੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ, ਪਾਈਨ ਸੂਈਆਂ ਵਿੱਚ ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੁਆਰਾ ਮਿਥਾਈਲੇਸ਼ਨ (ਛੋਟੇ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਦੇ ਇਕੱਠੇ ਹੋਣ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੀ ਇੱਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਜੋ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਵਿਸ਼ਾਲ ਵੈਕਿਊਲਾਂ ਵਿੱਚ ਰਲ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਫਟਣ ਅਤੇ ਮੌਤ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦੀ ਹੈ) ਦੀ ਇਹ ਪਹਿਲੀ ਰਿਪੋਰਟ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਵਪਾਰਕ ਨੇਮਾਟੀਸਾਈਡ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਦੇ ਸਮਾਨ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨੇਮਾਟੀਸਾਈਡਲ ਗੁਣ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਇੰਡੋਲ ਪਹਿਲਾਂ ਪ੍ਰੋਕੈਰੀਓਟਸ ਅਤੇ ਯੂਕੇਰੀਓਟਸ ਵਿੱਚ ਕਈ ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਫੰਕਸ਼ਨ ਕਰਨ ਦੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਬਾਇਓਫਿਲਮ ਰੋਕ/ਬਣਤਰ, ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਬਚਾਅ, ਅਤੇ ਜਰਾਸੀਮਤਾ 19,32,33,34 ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ, ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ, ਇੰਡੋਲ ਐਲਕਾਲਾਇਡਜ਼, ਅਤੇ ਅਰਧ-ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਇੰਡੋਲ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੇ ਸੰਭਾਵੀ ਇਲਾਜ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਨੇ ਵਿਆਪਕ ਖੋਜ ਦਿਲਚਸਪੀ ਨੂੰ ਆਕਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਹੈ35,36,37। ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਸਥਾਈ ਐਸਚੇਰੀਚੀਆ ਕੋਲੀ ਅਤੇ ਸਟੈਫ਼ੀਲੋਕੋਕਸ ਔਰੀਅਸ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਮਾਰਨ ਲਈ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ37। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਹੋਰ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ, ਪੀੜ੍ਹੀਆਂ ਅਤੇ ਰਾਜਾਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਦੀ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨਾ ਵਿਗਿਆਨਕ ਦਿਲਚਸਪੀ ਵਾਲਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਇਸ ਟੀਚੇ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਵੱਲ ਇੱਕ ਕਦਮ ਹੈ।
ਇੱਥੇ, ਅਸੀਂ C. ਐਲੀਗਨਸ ਵਿੱਚ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਘਾਤਕਤਾ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਧੀ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਦਿੰਦੇ ਹਾਂ ਜੋ ਰਿਵਰਸੀਬਲ ਸੈੱਲ ਸੱਟ (RCI) ਅਤੇ ਮਿਥਾਈਲੇਸ਼ਨ (ਚਿੱਤਰ 4C ਅਤੇ 5) 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ। ਐਡੀਮੇਟਸ ਬਦਲਾਅ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸੋਜ ਅਤੇ ਵੈਕਿਊਲਰ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ RCI ਅਤੇ ਮਿਥਾਈਲੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸੂਚਕ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਸਾਇਟੋਪਲਾਜ਼ਮ ਵਿੱਚ ਵਿਸ਼ਾਲ ਵੈਕਿਊਲ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਗਟ ਹੁੰਦੇ ਹਨ48,49। RCI ATP ਉਤਪਾਦਨ ਨੂੰ ਘਟਾ ਕੇ ਊਰਜਾ ਉਤਪਾਦਨ ਵਿੱਚ ਦਖਲ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ATPase ਪੰਪ ਦੀ ਅਸਫਲਤਾ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਸੈੱਲ ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਵਿਘਨ ਪਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ Na+, Ca2+, ਅਤੇ ਪਾਣੀ50,51,52 ਦਾ ਤੇਜ਼ ਪ੍ਰਵਾਹ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ ਹੈ। Ca2+ ਅਤੇ ਪਾਣੀ53 ਦੇ ਪ੍ਰਵਾਹ ਕਾਰਨ ਸਾਇਟੋਪਲਾਜ਼ਮ ਵਿੱਚ ਤਰਲ ਇਕੱਠਾ ਹੋਣ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਇੰਟਰਾਸਾਈਟੋਪਲਾਜ਼ਮਿਕ ਵੈਕਿਊਲ ਪੈਦਾ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਦਿਲਚਸਪ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ, ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਨੁਕਸਾਨ ਦੀ ਇਹ ਵਿਧੀ ਉਲਟੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜੇਕਰ ਨੁਕਸਾਨ ਅਸਥਾਈ ਹੋਵੇ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਇੱਕ ਨਿਸ਼ਚਿਤ ਸਮੇਂ ਲਈ ATP ਪੈਦਾ ਕਰਨਾ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰ ਦੇਣ, ਪਰ ਜੇਕਰ ਨੁਕਸਾਨ ਬਣਿਆ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਵਿਗੜਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਸੈੱਲ ਮਰ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।54 ਸਾਡੇ ਨਿਰੀਖਣ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨੇਮਾਟੋਡ ਤਣਾਅ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੇ ਸੰਪਰਕ ਵਿੱਚ ਆਉਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਆਮ ਬਾਇਓਸਿੰਥੇਸਿਸ ਨੂੰ ਬਹਾਲ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਅਸਮਰੱਥ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਬੀ. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ ਵਿੱਚ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਮਿਥਾਈਲੇਸ਼ਨ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਆਇਓਡੀਨ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਅਣੂ ਵੰਡ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ 7-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਬੀ. ਜ਼ਾਈਲੋਫਿਲਸ 'ਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (ਸਾਰਣੀ 1 ਅਤੇ ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S6) ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਰੋਕਥਾਮ ਪ੍ਰਭਾਵ ਸੀ। ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਮਾਲਟੀਜ਼ ਐਟ ਅਲ. (2014) ਦੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨਾਲ ਅੰਸ਼ਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਕਸਾਰ ਹਨ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਕਿ ਇੰਡੋਲ ਵਿੱਚ ਪਾਈਰੀਡਾਈਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਮੋਇਟੀ ਦਾ ਪੈਰਾ- ਤੋਂ ਮੈਟਾ-ਪੋਜੀਸ਼ਨ ਤੱਕ ਟ੍ਰਾਂਸਲੋਕੇਸ਼ਨ, ਵੈਕਿਊਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ, ਵਿਕਾਸ ਰੋਕ, ਅਤੇ U251 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਜੋ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ ਕਿ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਖਾਸ ਸਰਗਰਮ ਸਾਈਟ ਨਾਲ ਅਣੂ ਦੀ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ27,44,45। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਦੇਖੇ ਗਏ ਇੰਡੋਲ ਜਾਂ ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਗਲੂਸੀਐਲ ਰੀਸੈਪਟਰਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਵੀ ਇਸ ਧਾਰਨਾ ਦਾ ਸਮਰਥਨ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਕਿਉਂਕਿ 5- ਅਤੇ 2-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਨੂੰ ਜਾਂਚੇ ਗਏ ਦੂਜੇ ਇੰਡੋਲਾਂ ਨਾਲੋਂ ਵਧੇਰੇ ਮਜ਼ਬੂਤੀ ਨਾਲ ਗਲੂਸੀਐਲ ਰੀਸੈਪਟਰਾਂ ਨਾਲ ਜੋੜਨ ਲਈ ਪਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ (ਚਿੱਤਰ 6 ਅਤੇ ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ S8)। ਇੰਡੋਲ ਦੇ ਦੂਜੇ ਜਾਂ ਪੰਜਵੇਂ ਸਥਾਨ 'ਤੇ ਆਇਓਡੀਨ ਨੂੰ ਬੈਕਬੋਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡਾਂ ਰਾਹੀਂ GluCL ਰੀਸੈਪਟਰ ਦੇ ਲਿਊਸੀਨ 218 ਨਾਲ ਜੋੜਨ ਲਈ ਪਾਇਆ ਗਿਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਹੋਰ ਹੈਲੋਜਨੇਟਿਡ ਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਇੰਡੋਲ ਖੁਦ ਸੀਰੀਨ 260 (ਚਿੱਤਰ 6) ਨਾਲ ਕਮਜ਼ੋਰ ਸਾਈਡ-ਚੇਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਲਈ ਅਸੀਂ ਅੰਦਾਜ਼ਾ ਲਗਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਹੈਲੋਜਨ ਦਾ ਸਥਾਨੀਕਰਨ ਵੈਕਿਊਲਰ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ ਦੇ ਪ੍ਰੇਰਨਾ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਤੰਗ ਬਾਈਡਿੰਗ ਆਇਨ ਚੈਨਲ ਨੂੰ ਖੁੱਲ੍ਹਾ ਰੱਖਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਤੇਜ਼ ਤਰਲ ਪ੍ਰਵਾਹ ਅਤੇ ਵੈਕਿਊਲ ਫਟਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਮਿਲਦੀ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਵਿਧੀ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਬਾਕੀ ਹੈ।
5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੇ ਵਿਹਾਰਕ ਉਪਯੋਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਪੌਦਿਆਂ 'ਤੇ ਇਸਦੇ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਸਾਡੇ ਬੀਜ ਉਗਣ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦਾ ਬੀਜ ਉਗਣ ਜਾਂ ਬਾਅਦ ਦੀਆਂ ਵਿਕਾਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ 'ਤੇ ਕੋਈ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨਹੀਂ ਪਿਆ (ਚਿੱਤਰ 7)। ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਪਾਈਨ ਦੇ ਰੁੱਖਾਂ ਲਈ ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਦੀ ਨੁਕਸਾਨਦੇਹਤਾ ਨੂੰ ਕੰਟਰੋਲ ਕਰਨ ਲਈ ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਵਾਤਾਵਰਣ ਵਿੱਚ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਇੱਕ ਆਧਾਰ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਪਿਛਲੀਆਂ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਇੰਡੋਲ-ਅਧਾਰਤ ਥੈਰੇਪੀ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧ ਅਤੇ ਕੈਂਸਰ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦੀ ਸਮੱਸਿਆ ਨੂੰ ਹੱਲ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਸੰਭਾਵੀ ਪਹੁੰਚ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ55। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇੰਡੋਲ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਬੈਕਟੀਰੀਅਲ, ਕੈਂਸਰ ਵਿਰੋਧੀ, ਐਂਟੀਆਕਸੀਡੈਂਟ, ਸਾੜ ਵਿਰੋਧੀ, ਸ਼ੂਗਰ ਰੋਗ ਵਿਰੋਧੀ, ਐਂਟੀਵਾਇਰਲ, ਐਂਟੀਪ੍ਰੋਲੀਫੇਰੇਟਿਵ ਅਤੇ ਟੀਬੀ ਵਿਰੋਧੀ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਇਹ ਦਵਾਈ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਲਈ ਇੱਕ ਵਾਅਦਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਆਧਾਰ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ56,57। ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਪਹਿਲੀ ਵਾਰ ਆਇਓਡੀਨ ਦੀ ਇੱਕ ਐਂਟੀਪੈਰਾਸੀਟਿਕ ਅਤੇ ਐਂਥਲਮਿੰਟਿਕ ਏਜੰਟ ਵਜੋਂ ਸੰਭਾਵੀ ਵਰਤੋਂ ਦਾ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।
ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਦੀ ਖੋਜ ਤਿੰਨ ਦਹਾਕੇ ਪਹਿਲਾਂ ਹੋਈ ਸੀ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ 2015 ਵਿੱਚ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਮਿਲਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਐਂਥਲਮਿੰਟਿਕ ਵਜੋਂ ਅਜੇ ਵੀ ਸਰਗਰਮੀ ਨਾਲ ਜਾਰੀ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਅਤੇ ਕੀੜੇ-ਮਕੌੜਿਆਂ ਵਿੱਚ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਪ੍ਰਤੀ ਵਿਰੋਧ ਦੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਪਾਈਨ ਦੇ ਰੁੱਖਾਂ ਵਿੱਚ PWN ਲਾਗ ਨੂੰ ਕੰਟਰੋਲ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਕਲਪਿਕ, ਘੱਟ ਲਾਗਤ ਵਾਲੀ ਅਤੇ ਵਾਤਾਵਰਣ ਅਨੁਕੂਲ ਰਣਨੀਤੀ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ। ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਉਸ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਦੁਆਰਾ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਪਾਈਨ ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਨੂੰ ਮਾਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਵਿੱਚ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਲਈ ਘੱਟ ਜ਼ਹਿਰੀਲਾਪਣ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਇਸਦੇ ਭਵਿੱਖ ਦੇ ਵਪਾਰਕ ਉਪਯੋਗ ਲਈ ਚੰਗੀਆਂ ਸੰਭਾਵਨਾਵਾਂ ਖੋਲ੍ਹਦਾ ਹੈ।
ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਨੂੰ ਯੇਂਗਨਮ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ, ਗਯੋਂਗਸਨ, ਕੋਰੀਆ ਦੀ ਨੈਤਿਕਤਾ ਕਮੇਟੀ ਦੁਆਰਾ ਮਨਜ਼ੂਰੀ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨੂੰ ਯੇਂਗਨਮ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਦੀ ਨੈਤਿਕਤਾ ਕਮੇਟੀ ਦੇ ਦਿਸ਼ਾ-ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਅਨੁਸਾਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਅੰਡਿਆਂ ਦੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਯੋਗ ਸਥਾਪਿਤ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ43। ਹੈਚਿੰਗ ਰੇਟ (HR) ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ, 1-ਦਿਨ ਦੇ ਬਾਲਗ ਨੇਮਾਟੋਡ (ਲਗਭਗ 100 ਮਾਦਾ ਅਤੇ 100 ਨਰ) ਨੂੰ ਉੱਲੀਮਾਰ ਵਾਲੇ ਪੈਟਰੀ ਡਿਸ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਵਧਣ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ। ਫਿਰ ਅੰਡਿਆਂ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (0.05 mM ਅਤੇ 0.1 mM) ਜਾਂ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ (10 μg/ml) ਨਾਲ ਨਿਰਜੀਵ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਸਸਪੈਂਸ਼ਨ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਇਹਨਾਂ ਸਸਪੈਂਸ਼ਨਾਂ (500 μl; ਲਗਭਗ 100 ਅੰਡੇ) ਨੂੰ 24-ਖੂਹ ਵਾਲੇ ਟਿਸ਼ੂ ਕਲਚਰ ਪਲੇਟ ਦੇ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ 22 °C 'ਤੇ ਇਨਕਿਊਬ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। L2 ਗਿਣਤੀਆਂ ਨੂੰ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਦੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਪਰ ਜੇਕਰ ਸੈੱਲ ਇੱਕ ਵਧੀਆ ਪਲੈਟੀਨਮ ਤਾਰ ਨਾਲ ਉਤੇਜਿਤ ਹੋਣ 'ਤੇ ਹਿੱਲਦੇ ਨਹੀਂ ਸਨ ਤਾਂ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਮ੍ਰਿਤਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਸੀ। ਇਹ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੋ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਹਰੇਕ ਵਿੱਚ ਛੇ ਦੁਹਰਾਓ ਦੇ ਨਾਲ। ਦੋਵਾਂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੇ ਡੇਟਾ ਨੂੰ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। HR ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤਤਾ ਦੀ ਗਣਨਾ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ:
ਪਹਿਲਾਂ ਵਿਕਸਤ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਲਾਰਵੇ ਦੀ ਮੌਤ ਦਰ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਨੇਮਾਟੋਡ ਦੇ ਅੰਡੇ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ L2 ਪੜਾਅ ਦੇ ਲਾਰਵੇ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਹੈਚਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਭਰੂਣਾਂ ਨੂੰ ਸਮਕਾਲੀ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਮਕਾਲੀ ਲਾਰਵੇ (ਲਗਭਗ 500 ਨੇਮਾਟੋਡ) ਦਾ ਇਲਾਜ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ (0.05 mM ਅਤੇ 0.1 mM) ਜਾਂ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ (10 μg/ml) ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ B. cinerea Petri ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਪਾਲਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। 22 °C 'ਤੇ 48 ਘੰਟਿਆਂ ਦੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨੇਮਾਟੋਡਾਂ ਨੂੰ ਨਿਰਜੀਵ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ L2, L3, ਅਤੇ L4 ਪੜਾਵਾਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਲਈ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। L3 ਅਤੇ L4 ਪੜਾਵਾਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਨੇ ਲਾਰਵੇ ਦੇ ਪਰਿਵਰਤਨ ਨੂੰ ਦਰਸਾਇਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ L2 ਪੜਾਅ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਨੇ ਕੋਈ ਪਰਿਵਰਤਨ ਨਹੀਂ ਦਰਸਾਇਆ। iRiS™ ਡਿਜੀਟਲ ਸੈੱਲ ਇਮੇਜਿੰਗ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਚਿੱਤਰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਇਹ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੋ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਹਰੇਕ ਵਿੱਚ ਛੇ ਦੁਹਰਾਓ ਸਨ। ਦੋਵਾਂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੇ ਡੇਟਾ ਨੂੰ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਮੁਰਾਸ਼ੀਗੇ ਅਤੇ ਸਕੂਗ ਅਗਰ ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉਗਣ ਟੈਸਟਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਬੀਜਾਂ ਲਈ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਅਤੇ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਦੀ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇਪਣ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। 62 ਬੀ. ਓਲੇਰੇਸੀਆ ਅਤੇ ਆਰ. ਰੈਫਨਿਸਟਰਮ ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਇੱਕ ਦਿਨ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਭਿੱਜਿਆ ਗਿਆ, 1 ਮਿ.ਲੀ. 100% ਈਥੇਨੌਲ ਨਾਲ ਧੋਤਾ ਗਿਆ, 1 ਮਿ.ਲੀ. 50% ਵਪਾਰਕ ਬਲੀਚ (3% ਸੋਡੀਅਮ ਹਾਈਪੋਕਲੋਰਾਈਟ) ਨਾਲ 15 ਮਿੰਟ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ 1 ਮਿ.ਲੀ. ਨਿਰਜੀਵ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਪੰਜ ਵਾਰ ਧੋਤਾ ਗਿਆ। ਫਿਰ ਨਿਰਜੀਵ ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ 0.86 ਗ੍ਰਾਮ/ਲੀਟਰ (0.2X) ਮੁਰਾਸ਼ੀਗੇ ਅਤੇ ਸਕੂਗ ਮਾਧਿਅਮ ਅਤੇ 0.7% ਬੈਕਟੀਰੀਓਲੋਜੀਕਲ ਅਗਰ ਵਾਲੀਆਂ ਉਗਣ ਅਗਰ ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਦਬਾਇਆ ਗਿਆ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 5-ਆਇਓਡੋਇੰਡੋਲ ਜਾਂ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਬਿਨਾਂ ਸਨ। ਫਿਰ ਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ 22 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ 3 ਦਿਨਾਂ ਦੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਤਸਵੀਰਾਂ ਲਈਆਂ ਗਈਆਂ। ਇਹ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੋ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਹਰੇਕ ਵਿੱਚ ਛੇ ਦੁਹਰਾਓ ਸਨ।