ਊਰਸਾ ਮੋਨੋਆਮਾਈਡਜ਼ ਦੀ ਖੋਜ, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਕਾਰਜਾਤਮਕ ਸੁਧਾਰ ਪੌਦੇ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਇਨ੍ਹੀਬੀਟਰਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਜੋ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਲ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ।

Nature.com 'ਤੇ ਜਾਣ ਲਈ ਤੁਹਾਡਾ ਧੰਨਵਾਦ।ਤੁਹਾਡੇ ਦੁਆਰਾ ਵਰਤੇ ਜਾ ਰਹੇ ਬ੍ਰਾਊਜ਼ਰ ਦਾ ਸੰਸਕਰਣ ਸੀਮਤ CSS ਸਮਰਥਨ ਹੈ।ਵਧੀਆ ਨਤੀਜਿਆਂ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਆਪਣੇ ਬ੍ਰਾਊਜ਼ਰ ਦਾ ਨਵਾਂ ਸੰਸਕਰਣ ਵਰਤੋ (ਜਾਂ Internet Explorer ਵਿੱਚ ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਮੋਡ ਨੂੰ ਅਯੋਗ ਕਰੋ)।ਇਸ ਦੌਰਾਨ, ਚੱਲ ਰਹੇ ਸਮਰਥਨ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਾਈਟ ਨੂੰ ਸਟਾਈਲਿੰਗ ਜਾਂ ਜਾਵਾ ਸਕ੍ਰਿਪਟ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਦਿਖਾ ਰਹੇ ਹਾਂ।
ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਖੋਜ ਅਤੇ ਲਾਹੇਵੰਦ ਵਰਤੋਂ ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਵਨ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਵਾਲੇ ਰਸਾਇਣਾਂ ਨੂੰ ਨਦੀਨਾਂ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਿਸਮਾਂ ਦੀਆਂ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਕਿਰਿਆ ਦੇ ਨਵੇਂ ਢੰਗਾਂ ਨਾਲ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਸਟ੍ਰੈਪਟੋਮਾਈਸੇਸ ਵੈਰੇਨਸਿਸ MK493-CF1 ਤੋਂ ਇੱਕ ਨਾਵਲ N -alkoxypyrrole ਮਿਸ਼ਰਣ, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਦੀ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਸੰਪੂਰਨ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਸਥਾਪਨਾ ਕੀਤੀ।ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਸੈਸ ਦੁਆਰਾ, ਅਸੀਂ ਖੋਜਿਆ ਕਿ urs-monoamic acid urs-monoamide ਦਾ ਇੱਕ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ ਹੈ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸੰਭਾਵੀਪੌਦੇ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਵਾਲਾ.ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਸੀਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ urbenonic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ urbenyloxy ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ (UDA), ਜਿਸ ਵਿੱਚ HeLa ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਉੱਚ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਇਹ ਵੀ ਪਾਇਆ ਕਿ urmotonic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਲਜ਼ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜਦੇ ਹਨ;ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, KAND ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ;ਇਹ ਬਹੁਪੱਖੀ ਪ੍ਰਭਾਵ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰੇ ਹਨ ਅਤੇ ursonic ਐਸਿਡ ਲਈ ਕਾਰਵਾਈ ਦੀ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਵਿਧੀ ਦਾ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਨਵੇਂ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਫਾਇਦਾ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਲਾਭਦਾਇਕ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੀ ਖੋਜ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕ ਉਪਯੋਗ ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਵਨ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਨ ਦਾ ਇੱਕ ਸਾਧਨ ਹੈ।ਸੂਖਮ ਜੀਵਾਣੂਆਂ, ਪੌਦਿਆਂ ਅਤੇ ਕੀੜੇ-ਮਕੌੜਿਆਂ ਦੁਆਰਾ ਪੈਦਾ ਕੀਤੇ ਸੈਕੰਡਰੀ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਨੇ ਦਵਾਈ ਅਤੇ ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਵਿੱਚ ਵੱਡੀ ਤਰੱਕੀ ਕੀਤੀ ਹੈ।ਬਹੁਤ ਸਾਰੀਆਂ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕਸ ਅਤੇ ਐਂਟੀ-ਲਿਊਕੇਮੀਆ ਦਵਾਈਆਂ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਤੋਂ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਕਈ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇਕੀਟਨਾਸ਼ਕ, ਉੱਲੀਨਾਸ਼ਕ ਅਤੇ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਨੂੰ ਇਹਨਾਂ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਤੋਂ ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਵਿੱਚ ਵਰਤਣ ਲਈ ਕੱਢਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਨਦੀਨ ਨਿਯੰਤਰਣ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਨੂੰ ਆਧੁਨਿਕ ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਵਿੱਚ ਫਸਲਾਂ ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਸੰਦ ਹਨ, ਅਤੇ ਕਈ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਵਪਾਰਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਪੌਦਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕਈ ਸੈਲੂਲਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਣ, ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ, ਸੈੱਲ ਕੰਧ ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਣ, ਮਾਈਟੋਸਿਸ ਦਾ ਨਿਯਮ, ਫਾਈਟੋਹਾਰਮੋਨ ਸਿਗਨਲਿੰਗ, ਜਾਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ, ਨੂੰ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਖਾਸ ਨਿਸ਼ਾਨੇ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਮਿਸ਼ਰਣ ਜੋ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਫੰਕਸ਼ਨ ਨੂੰ ਰੋਕਦੇ ਹਨ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੀ ਇੱਕ ਆਮ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਹੈ ਜੋ ਮਾਈਟੋਟਿਕ ਰੈਗੂਲੇਸ਼ਨ 2 ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਕੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰਦੀ ਹੈ।
ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਸਾਇਟੋਸਕਲੀਟਨ ਦੇ ਹਿੱਸੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਯੂਕੇਰੀਓਟਿਕ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਟਿਊਬਲਿਨ ਹੇਟਰੋਡਾਈਮਰ ਵਿੱਚ α-ਟਿਊਬਲਿਨ ਅਤੇ β-ਟਿਊਬਿਲੀਨ ਲੀਨੀਅਰ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਪ੍ਰੋਟੋਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਬਣਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ 13 ਪ੍ਰੋਟੋਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਇੱਕ ਸਿਲੰਡਰ ਬਣਤਰ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਕਈ ਭੂਮਿਕਾਵਾਂ ਨਿਭਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸੈੱਲ ਦੀ ਸ਼ਕਲ, ਸੈੱਲ ਡਿਵੀਜ਼ਨ, ਅਤੇ ਇੰਟਰਾਸੈਲੂਲਰ ਟਰਾਂਸਪੋਰਟ 3,4 ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਇੰਟਰਫੇਸ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹ ਅਖੌਤੀ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਸਿੰਥੇਜ਼ ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ 4,5 ਦੇ ਨਿਯੰਤ੍ਰਣ ਦੁਆਰਾ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਮਾਈਕ੍ਰੋਫਾਈਬਰਿਲਜ਼ ਦੇ ਸੰਗਠਨ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਸੋਚਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਰੂਟ ਐਪੀਡਰਮਲ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼, ਜੜ੍ਹ ਦੀ ਨੋਕ ਦੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਜ਼ੋਨ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਸਥਿਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਮਾਈਕ੍ਰੋਫਾਈਬਰ ਇਹਨਾਂ ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਲਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਦੇ ਵਿਸਤਾਰ ਦੀ ਦਿਸ਼ਾ ਨੂੰ ਸੀਮਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਐਨੀਸੋਟ੍ਰੋਪਿਕ ਸੈੱਲ ਲੰਬਾਈ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਲਈ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਫੰਕਸ਼ਨ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨ ਨਾਲ ਨੇੜਿਓਂ ਸਬੰਧਤ ਹੈ।ਜੀਨਾਂ ਦੇ ਏਨਕੋਡਿੰਗ ਟਿਊਬਲਿਨ ਵਿੱਚ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਦੇ ਬਦਲ ਕਾਰਨ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਐਰੇਜ਼ ਅਤੇ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ 6,7 ਵਿੱਚ ਖੱਬੇ- ਜਾਂ ਸੱਜੇ-ਪਾਸੇ ਵਾਧੇ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ-ਸਬੰਧਤ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਵਿੱਚ ਪਰਿਵਰਤਨ ਜੋ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਗਤੀਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, 8,9,10,11,12,13 ਨੂੰ ਵਿਗਾੜ ਕੇ ਜੜ੍ਹ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ-ਵਿਘਨ ਪਾਉਣ ਵਾਲੇ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰੀਟੀਲਾਕਲੋਰ ਵੀ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਵੀ ਖੱਬੇ-ਪਾਸੇ ਤਿਰਛੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਅੰਕੜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਦੀ ਦਿਸ਼ਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਫੰਕਸ਼ਨ ਦਾ ਸਟੀਕ ਨਿਯਮ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।
ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਇਨਿਹਿਬਟਰਸ ਦੀ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਦਵਾਈਆਂ ਨੇ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲੇਟਲ ਖੋਜ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਅਤੇ ਦਵਾਈ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾਇਆ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ, ਡਾਇਨਟ੍ਰੋਏਨਲਾਈਨ ਮਿਸ਼ਰਣ, ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ, ਬੈਂਜ਼ਾਮਾਈਡ-ਸਬੰਧਤ ਮਿਸ਼ਰਣ, ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਐਨਾਲਾਗ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਫੰਕਸ਼ਨ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪੌਦੇ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਲਈ, ਉਹ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਕਿਉਂਕਿ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਪੌਦਿਆਂ ਅਤੇ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹਿੱਸਾ ਹਨ, ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਇਨ੍ਹੀਬੀਟਰ ਦੋਵੇਂ ਸੈੱਲ ਕਿਸਮਾਂ ਲਈ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਲਈ, ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਮਾਨਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਉਪਯੋਗਤਾ ਦੇ ਬਾਵਜੂਦ, ਵਿਹਾਰਕ ਉਦੇਸ਼ਾਂ ਲਈ ਸੀਮਤ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਮਾਈਕ੍ਰੋਟੂਬਿਊਲ ਏਜੰਟ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਸਟ੍ਰੈਪਟੋਮਾਈਸਿਸ ਪਰਿਵਾਰ ਸਟ੍ਰੈਪਟੋਮਾਇਸਿਸ ਦੀ ਇੱਕ ਜੀਨਸ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਐਰੋਬਿਕ, ਗ੍ਰਾਮ-ਸਕਾਰਾਤਮਕ, ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ ਅਤੇ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੈਕੰਡਰੀ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਲਈ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਇਸ ਨੂੰ ਨਵੇਂ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਸਭ ਤੋਂ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਸਰੋਤਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਨਾਮਕ ਇੱਕ ਨਵੇਂ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੀ ਖੋਜ ਕੀਤੀ, ਜੋ ਕਿ ਸਟ੍ਰੈਪਟੋਮਾਇਸਿਸ ਵੈਰਰੇਨਸਿਸ MK493-CF1 ਅਤੇ S. werraensis ISP 5486 ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਪੈਕਟ੍ਰਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਪੂਰੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਦੀ ਬਣਤਰ ਨੂੰ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਸੀ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਵਿਲੱਖਣ ਐੱਨ. ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ.ਸੰਸਲੇਸ਼ਣਉਰਸਮੋਨਿਕ ਐਸਿਡ, ursmonoamide ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦਾ ਇੱਕ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ, ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਮਾਡਲ ਪੌਦੇ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਥਲੀਆਨਾ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਅਤੇ ਉਗਣ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਪਾਇਆ ਗਿਆ।ਸੰਰਚਨਾ-ਸਰਗਰਮੀ ਸਬੰਧ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ C9 ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ursonic acid ਵਿੱਚ ਸੋਧਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਜਿਸਨੂੰ ursonic acid (KAND) ਦਾ ਨਾਨਿਲੌਕਸੀ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਵਿਕਾਸ ਅਤੇ ਉਗਣ 'ਤੇ ਰੋਕਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਧਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਨਵੇਂ ਖੋਜੇ ਗਏ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਵਾਲੇ ਨੇ ਤੰਬਾਕੂ ਅਤੇ ਲਿਵਰਵਰਟ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਵੀ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਜਾਂ ਹੇਲਾ ਸੈੱਲਾਂ ਲਈ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਕ ਨਹੀਂ ਸੀ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਕੁਝ ਉਰਮੋਟੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਇੱਕ ਵਿਗਾੜਿਤ ਰੂਟ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਪੈਦਾ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਿਸਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਸਿੱਧੇ ਜਾਂ ਅਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਲ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਵਿਚਾਰ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਸਾਡੇ ਨਿਰੀਖਣ ਜਾਂ ਤਾਂ ਇਮਯੂਨੋਹਿਸਟੋਕੈਮਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਾਂ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨਾਲ ਲੇਬਲ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ KAND ਟ੍ਰੀਟਮੈਂਟ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਨੂੰ ਡੀਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਕੁਮਾਮੋਟੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਨੇ ਐਕਟਿਨ ਮਾਈਕ੍ਰੋਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜ ਦਿੱਤਾ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਅਸੀਂ ਇੱਕ ਨਵੇਂ ਪੌਦੇ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਵਾਲੇ ਦੀ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਹੈ ਜਿਸਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਿਲੱਖਣ ਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਸਾਈਟੋਸਕੇਲਟਨ ਦਾ ਵਿਨਾਸ਼ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।
ਸਟ੍ਰੇਨ MK493-CF1 ਨੂੰ ਸ਼ਿਨਾਗਾਵਾ-ਕੂ, ਟੋਕੀਓ ਵਿੱਚ ਮਿੱਟੀ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਟ੍ਰੇਨ MK493-CF1 ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸ਼ਾਖਾਵਾਂ ਵਾਲਾ ਸਟ੍ਰੋਮਲ ਮਾਈਸੀਲੀਅਮ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।16S ribosomal RNA ਜੀਨ (1422 bp) ਦਾ ਅੰਸ਼ਕ ਕ੍ਰਮ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਹ ਖਿਚਾਅ S. werraensis (NBRC 13404T = ISP 5486, 1421/1422 bp, T: ਖਾਸ ਖਿਚਾਅ, 99.93%) ਨਾਲ ਬਹੁਤ ਮਿਲਦਾ ਜੁਲਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਨਤੀਜੇ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ, ਇਹ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਕਿ ਇਹ ਤਣਾਅ S. werraensis ਦੀ ਕਿਸਮ ਦੇ ਤਣਾਅ ਨਾਲ ਨੇੜਿਓਂ ਸਬੰਧਤ ਸੀ।ਇਸ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਅਸਥਾਈ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਸ ਤਣਾਅ ਨੂੰ S. werraensis MK493-CF1 ਦਾ ਨਾਮ ਦਿੱਤਾ ਹੈ।S. werraensis ISP 5486T ਵੀ ਉਹੀ ਬਾਇਓਐਕਟਿਵ ਮਿਸ਼ਰਣ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਇਸ ਸੂਖਮ ਜੀਵਾਣੂ ਤੋਂ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਖੋਜ ਹੋਈ ਸੀ, ਇਸ ਲਈ ਹੋਰ ਰਸਾਇਣਕ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।S. werraensis MK493-CF1 ਦੀ ਜੌਂ ਦੇ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਠੋਸ-ਸਟੇਟ ਫਰਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ 14 ਦਿਨਾਂ ਲਈ 30°C 'ਤੇ ਕਾਸ਼ਤ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਮਾਧਿਅਮ ਨੂੰ 50% EtOH ਨਾਲ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।59.5 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਕੱਚੇ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ 60 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਸੁਕਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਕੱਚੇ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਨੂੰ N-methoxy-1H-pyrrole-2-carboxamide (1, ਨਾਮਕ ਕੋਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ, 36.0 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਦੇਣ ਲਈ ਉਲਟ ਪੜਾਅ HPLC ਦੇ ਅਧੀਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।1 ਦੀ ਕੁੱਲ ਮਾਤਰਾ ਕੱਚੇ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦਾ ਲਗਭਗ 60% ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਕੁਮਾਮੋਟੋਆਮਾਈਡ 1 ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦਾ ਵਿਸਥਾਰ ਨਾਲ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਦਾ ਫੈਸਲਾ ਕੀਤਾ ਹੈ.
ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ 1 ਇੱਕ ਸਫੈਦ ਅਮੋਰਫਸ ਪਾਊਡਰ ਹੈ ਅਤੇ ਉੱਚ ਰੈਜ਼ੋਲੂਸ਼ਨ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟਰੋਮੈਟਰੀ (HRESIMS) C6H8N2O2 (ਚਿੱਤਰ 1) ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦਾ C2-ਸਥਾਪਿਤ ਪਾਈਰੋਲ ਟੁਕੜਾ δH 6.94 (1H, t, J = 2.8, 4.8 Hz, H-4), δH 6.78 (1H, d, J = 2.5, δH 1H NMR ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ: 4.5 Hz) ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ , H-5) ਅਤੇ δH 6.78 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-6), ਅਤੇ 13C NMR ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ ਚਾਰ sp2 ਕਾਰਬਨ ਐਟਮਾਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।C2 ਸਥਿਤੀ 'ਤੇ ਇੱਕ ਐਮਾਈਡ ਸਮੂਹ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ δC 161.1 'ਤੇ C-3 ਪ੍ਰੋਟੋਨ ਤੋਂ ਐਮਾਈਡ ਕਾਰਬੋਨੀਲ ਕਾਰਬਨ ਨਾਲ HMBC ਸਬੰਧ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, δH 4.10 (3H, S) ਅਤੇ δC 68.3 'ਤੇ 1 H ਅਤੇ 13 C NMR ਸਿਖਰ ਅਣੂ ਵਿੱਚ N-methoxy ਸਮੂਹਾਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਹਾਲਾਂਕਿ ਮੈਥੋਕਸੀ ਸਮੂਹ ਦੀ ਸਹੀ ਸਥਿਤੀ ਅਜੇ ਤੱਕ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਸਕੋਪਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਅੰਤਰ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਅਤੇ ਨਿਊਕਲੀਅਰ ਓਵਰਹਾਊਜ਼ਰ ਸੰਖੇਪ (NOEDF) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, N-methoxy-1H-pyrrole-2-carboxamide ਪਹਿਲਾ ਉਮੀਦਵਾਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਬਣ ਗਿਆ।
1 ਦੀ ਸਹੀ ਬਣਤਰ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ, ਕੁੱਲ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ (ਚਿੱਤਰ 2a).ਐਮ-ਸੀਪੀਬੀਏ ਨਾਲ ਵਪਾਰਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਉਪਲਬਧ 2-ਐਮੀਨੋਪਾਈਰੀਡਾਈਨ 2 ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਉਪਜ ਵਿੱਚ ਅਨੁਸਾਰੀ ਐਨ-ਆਕਸਾਈਡ 3 ਨਿਕਲਿਆ।2 ਦੇ 2-ਅਮੀਨੋਅਜ਼ੀਡੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਅਬਰਾਮੋਵਿਚ ਦੁਆਰਾ ਵਰਣਿਤ ਸਾਈਕਲੋਕਡੈਂਸੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ 90 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਬੈਂਜੀਨ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ ਗ੍ਰਾਮ ਵਿੱਚ ਲੋੜੀਦਾ 1-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸੀ-1ਐਚ-ਪਾਇਰੋਲ-2-ਕਾਰਬੋਨੀਟ੍ਰਾਈਲ 5 ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ।ਸਪੀਡ 60% (ਦੋ ਪੜਾਅ)।15,16.4 ਦੇ ਮੈਥਾਈਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਹਾਈਡੋਲਿਸਿਸ ਨੇ ਫਿਰ ਚੰਗੀ ਪੈਦਾਵਾਰ (70%, ਦੋ ਕਦਮ) ਵਿੱਚ 1-ਮੇਥੋਕਸੀ-1ਐਚ-ਪਾਇਰੋਲ-2-ਕਾਰਬੋਕਸਿਲਿਕ ਐਸਿਡ (“ਕਿਊਮੋਟੋਨਿਕ ਐਸਿਡ”, 6) ਦਿੱਤਾ।ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਜਲਮਈ ਅਮੋਨੀਆ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਐਸਿਡ ਕਲੋਰਾਈਡ ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ 6 ਦੁਆਰਾ ਐਮਿਡੇਸ਼ਨ ਨੇ ਕੁਮਾਮੋਟੋ ਐਮਾਈਡ 1 ਨੂੰ 98% ਝਾੜ ਦਿੱਤਾ।ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ਡ 1 ਦੇ ਸਾਰੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰਲ ਡੇਟਾ ਵੱਖਰੇ 1 ਦੇ ਸਮਾਨ ਸਨ, ਇਸਲਈ 1 ਦੀ ਬਣਤਰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ;
ਆਮ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ urbenamide ਅਤੇ urbenic ਐਸਿਡ ਦੀ ਜੈਵਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ.(a) ਕੁਮਾਮੋਟੋ ਐਮਾਈਡ ਦਾ ਕੁੱਲ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ।(ਬੀ) ਸੱਤ-ਦਿਨ ਪੁਰਾਣੇ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਕੋਲੰਬੀਆ (ਕੋਲ) ਦੇ ਬੂਟੇ ਮੁਰਸ਼ੀਗੇ ਅਤੇ ਸਕੂਗ (ਐੱਮ.ਐੱਸ.) ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ 6 ਜਾਂ ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ 1 ਵਾਲੇ ਸੰਕੇਤਾਂ 'ਤੇ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ।ਸਕੇਲ ਪੱਟੀ = 1 ਸੈ.ਮੀ.
ਪਹਿਲਾਂ, ਅਸੀਂ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਸੰਚਾਲਿਤ ਕਰਨ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਲਈ urbenamide ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦੀਆਂ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ।ਅਸੀਂ ਇਸ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਯੂਰਸਮੋਨਾਮਾਈਡ 1 ਜਾਂ ਯੂਰਸਮੋਨਿਕ ਐਸਿਡ 6 ਦੀ ਐੱਮ.ਐੱਸ. ਐਗਰ ਮਾਧਿਅਮ ਅਤੇ ਸੰਸਕ੍ਰਿਤ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਥਾਲੀਆਨਾ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ।ਇਹਨਾਂ ਅਸੈਸਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ 6 ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (500 μM) ਰੂਟ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਦੀ ਹੈ (ਚਿੱਤਰ 2b).ਅੱਗੇ, ਅਸੀਂ 6 ਦੀ N1 ਸਥਿਤੀ ਨੂੰ ਬਦਲ ਕੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ 'ਤੇ ਬਣਤਰ-ਸਰਗਰਮੀ ਸਬੰਧ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤੇ (ਐਨਾਲਾਗ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਵਰਣਨ ਸਹਾਇਕ ਜਾਣਕਾਰੀ (SI) ਵਿੱਚ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ)।ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਦੇ ਬੂਟੇ 50 μM ursonic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਵਾਲੇ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ, ਅਤੇ ਜੜ੍ਹ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਤਸਵੀਰ 'ਤੇ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 3a, b, ਅਤੇ S1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਕੂਮਾਮੋ ਐਸਿਡ ਵਿੱਚ N1 ਸਥਿਤੀ 'ਤੇ ਲੀਨੀਅਰ ਅਲਕੋਕਸੀ ਚੇਨਾਂ (9, 10, 11, 12, ਅਤੇ 13) ਜਾਂ ਵੱਡੀਆਂ ਅਲਕੋਕਸੀ ਚੇਨਾਂ (15, 16, ਅਤੇ 17) ਦੀਆਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਲੰਬਾਈਆਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ।ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਨੇ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਰੁਕਾਵਟ ਦਿਖਾਈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਹੈ ਕਿ 200 μM 10, 11, ਜਾਂ 17 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਵਾਲੇ ਉਗਣ (Figs. 3c ਅਤੇ S2).
ਕੁਮਾਮੋਟੋ ਐਮਾਈਡ ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਬਣਤਰ-ਸਰਗਰਮੀ ਸਬੰਧਾਂ ਦਾ ਅਧਿਐਨ।(a) ਐਨਾਲਾਗਸ ਦੀ ਬਣਤਰ ਅਤੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਸਕੀਮ।(b) 50 μM ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਬਿਨਾਂ MS ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਾਈ ਗਈ 7-ਦਿਨ-ਪੁਰਾਣੀ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਜੜ੍ਹ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਦੀ ਮਾਤਰਾ।ਤਾਰੇ ਨਕਲੀ ਇਲਾਜ ਦੇ ਨਾਲ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ (ਟੀ ਟੈਸਟ, ਪੀ< 0.05)।n>18. ਡੇਟਾ ਦਾ ਮਤਲਬ ± SD ਵਜੋਂ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।nt ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ "ਟੈਸਟ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ" ਕਿਉਂਕਿ 50% ਤੋਂ ਵੱਧ ਬੀਜ ਉਗਦੇ ਨਹੀਂ ਹਨ।(c) 200 μM ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਇਸ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ MS ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ 7 ​​ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਬੀਜਾਂ ਦੇ ਉਗਣ ਦੀ ਦਰ ਦੀ ਮਾਤਰਾ।ਤਾਰੇ ਸ਼ੈਮ ਇਲਾਜ (ਚੀ-ਵਰਗ ਟੈਸਟ) ਨਾਲ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।n=96.
ਦਿਲਚਸਪ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ, C9 ਤੋਂ ਲੰਮੀ ਅਲਕਾਈਲ ਸਾਈਡ ਚੇਨਾਂ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਨਾਲ ਨਿਰੋਧਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਘਟਦੀ ਹੈ, ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੀ ਹੈ ਕਿ ਕੁਮਾਮੋਟੋਇਕ ਐਸਿਡ-ਸਬੰਧਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਜੈਵਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਖਾਸ ਆਕਾਰ ਦੀਆਂ ਸਾਈਡ ਚੇਨਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਕਿਉਂਕਿ ਬਣਤਰ-ਸਰਗਰਮੀ ਸਬੰਧਾਂ ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ C9 ਨੂੰ ursonic acid ਵਿੱਚ ਸੋਧਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ursonic acid ਦਾ nonyloxy ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ (ਇਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ KAND 11 ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ) ਸਭ ਤੋਂ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਵਾਲਾ ਸੀ, ਅਸੀਂ KAND 11 ਦੀ ਇੱਕ ਹੋਰ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦਾ ਆਯੋਜਨ ਕੀਤਾ। ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਦਾ ਇਲਾਜ। 50 μM KAND 11 ਦੇ ਨਾਲ ਲਗਭਗ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਉਗਣ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ ਗਿਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ KAND 11 ਦੀ ਘੱਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (40, 30, 20, ਜਾਂ 10 μM) ਖੁਰਾਕ-ਨਿਰਭਰ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਰੋਕਦੀ ਹੈ (ਚਿੱਤਰ 4a, b)।ਇਹ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਕਿ ਕੀ KAND 11 ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਵਿਵਹਾਰਕਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਸੀਂ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (PI) ਨਾਲ ਰੰਗੇ ਹੋਏ ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਮੈਰੀਸਟਮ ਖੇਤਰ ਦੇ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ।25 μM KAND-11 ਵਾਲੇ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਾਈ ਗਈ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਮੈਰੀਸਟਮ ਦਾ ਆਕਾਰ 151.1 ± 32.5 μm ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ DMSO ਵਾਲੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਮੇਰਿਸਟਮ ਦਾ ਆਕਾਰ 264.7 ± 30.8 μm, ਐੱਫ.ਆਈ.ਜੀ.ਡੀ.ਮੀ., ਸੀ. , ਜੋ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ KAND-11 ਸੈਲੂਲਰ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਬਹਾਲ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਫੈਲਣਾਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ.ਇਸ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ, KAND 11 ਦੇ ਇਲਾਜ ਨੇ ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ (ਚਿੱਤਰ 4e) 17 ਵਿੱਚ ਸੈੱਲ ਡਿਵੀਜ਼ਨ ਮਾਰਕਰ CDKB2;1p::CDKB2;1-GUS ਸਿਗਨਲ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ।ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ KAND 11 ਸੈੱਲ ਫੈਲਣ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਘਟਾ ਕੇ ਜੜ੍ਹ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।
ਵਿਕਾਸ 'ਤੇ urbenonic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ (urbenyloxy ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼) ਦੇ ਨਿਰੋਧਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ.(a) 7-ਦਿਨ-ਪੁਰਾਣੇ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਕੌਲ ਬੂਟੇ MS ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਕਾਂਡ 11 ਦੀ ਦਰਸਾਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਨਾਲ ਉਗਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 1 ਸੈ.ਮੀ.(ਬੀ) ਜੜ੍ਹ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਦੀ ਮਾਤਰਾ।ਅੱਖਰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ (ਟੁਕੀ ਐਚਐਸਡੀ ਟੈਸਟ, ਪੀ< 0.05)।n>16. ਡੇਟਾ ਦਾ ਮਤਲਬ ± SD ਵਜੋਂ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।(c) 25 μM ਕੰਡ 11 ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਇਸ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ MS ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ-ਸਟੇਨਡ ਵਾਈਲਡ-ਟਾਈਪ ਕੋਲ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੀ ਕਨਫੋਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ।ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 100 µm।(d) ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਆਕਾਰ ਦੀ ਮਾਤਰਾ (n = 10 ਤੋਂ 11)।ਅੰਕੜਿਆਂ ਦੇ ਅੰਤਰ ਨੂੰ ਟੀ-ਟੈਸਟ (ਪੀ< 0.05)।ਬਾਰ ਔਸਤ ਮੈਰੀਸਟਮ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।(e) CDKB2 ਕੰਸਟਰੱਕਟ ਵਾਲੇ ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਦੀ ਡਿਫਰੈਂਸ਼ੀਅਲ ਇੰਟਰਫਰੈਂਸ ਕੰਟ੍ਰਾਸਟ (DIC) ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ;1pro: CDKB2;1-GUS 25 µM KAND ਪਰਖ ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਇਸ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ MS ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ 5-ਦਿਨ ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਪੌਦਿਆਂ 'ਤੇ ਦਾਗ ਅਤੇ ਦਾਗ।
KAND 11 ਦੀ ਫਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਨੂੰ ਹੋਰ ਡਾਇਕੋਟੀਲੇਡੋਨਸ ਪਲਾਂਟ, ਤੰਬਾਕੂ (ਨਿਕੋਟੀਆਨਾ ਟੈਬੈਕਮ), ਅਤੇ ਇੱਕ ਪ੍ਰਮੁੱਖ ਭੂਮੀ ਪੌਦੇ ਮਾਡਲ ਜੀਵ, ਲਿਵਰਵਰਟ (ਮਾਰਚੈਂਟੀਆ ਪੋਲੀਮੋਰਫਾ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪਰਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਦੇ ਮਾਮਲੇ ਵਿੱਚ, ਤੰਬਾਕੂ SR-1 ਦੇ ਬੂਟੇ 25 μM KAND 11 ਵਾਲੇ ਮਾਧਿਅਮ ਉੱਤੇ ਉਗਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਛੋਟੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰਦੇ ਹਨ (ਚਿੱਤਰ 5a)।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, 48 ਵਿੱਚੋਂ 40 ਬੀਜ 200 μM KAND 11 ਵਾਲੀਆਂ ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉੱਗਦੇ ਹਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸਾਰੇ 48 ਬੀਜ ਨਕਲੀ-ਇਲਾਜ ਵਾਲੇ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਦੇ ਹਨ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ KAND ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਸੀ (ਪੀ.<0.05;chi test -square) ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਉਗਣ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।(ਚਿੱਤਰ 5 ਬੀ).ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, KAND 11 ਦੀ ਤਵੱਜੋ ਜੋ ਕਿ ਲਿਵਰਵਰਟ ਵਿੱਚ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਦੀ ਹੈ, ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ (ਚਿੱਤਰ 5c) ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਤਵੱਜੋ ਦੇ ਸਮਾਨ ਸੀ।ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ KAND 11 ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਇੱਕ ਕਿਸਮ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਫਿਰ ਅਸੀਂ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਉੱਚ ਜਾਨਵਰਾਂ ਅਤੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧਾਂ ਵਜੋਂ, ਦੂਜੇ ਜੀਵਾਂ, ਅਰਥਾਤ ਮਨੁੱਖੀ HeLa ਸੈੱਲਾਂ ਅਤੇ Escherichia coli strain DH5α ਵਿੱਚ ਰਿੱਛ ਦੇ ਮੋਨੋਆਮਾਈਡ-ਸਬੰਧਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੀ ਸੰਭਾਵਿਤ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ।ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਅਸੈਸਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਲੜੀ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਕਿ ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ 1, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡਿਕ ਐਸਿਡ 6, ਅਤੇ KAND 11 ਨੇ 100 μM (ਚਿੱਤਰ 5d,e) ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ HeLa ਜਾਂ E. ਕੋਲੀ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ।
ਗੈਰ-ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਜੀਵਾਣੂਆਂ ਵਿੱਚ KAND 11 ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਣਾ।(a) ਦੋ-ਹਫ਼ਤੇ-ਪੁਰਾਣੇ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ SR-1 ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਬੂਟੇ 25 μM KAND 11 ਵਾਲੀ ਖੜ੍ਹਵੀਂ ਸਥਿਤੀ ਵਾਲੀਆਂ MS ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ। (b) ਦੋ-ਹਫ਼ਤੇ ਪੁਰਾਣੇ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ SR-1 ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਬੂਟੇ ਖਿਤਿਜੀ ਸਥਿਤੀ 'ਤੇ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ। MS ਪਲੇਟਾਂ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 200 μM KAND 11 ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ। (c) ਦੋ-ਹਫ਼ਤੇ-ਪੁਰਾਣੇ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਟਾਕ-1 ਲਿਵਰਵਰਟ ਦੀਆਂ ਮੁਕੁਲ ਜੋ ਗੈਂਬੋਰਗ ਬੀ5 ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਕਾਂਡ 11 ਦੀ ਸੰਕੇਤਿਤ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨਾਲ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ। ਲਾਲ ਤੀਰ ਬੀਜਾਣੂਆਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਜੋ ਦੋ-ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਦੇ ਅੰਦਰ ਵਧਣਾ ਬੰਦ ਕਰ ਦਿੰਦੇ ਹਨ। ਮਿਆਦ.(d) HeLa ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਸਾਰ ਪਰਖ।ਵਿਹਾਰਕ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਇੱਕ ਸੈੱਲ ਕਾਉਂਟਿੰਗ ਕਿੱਟ 8 (ਡੋਜਿੰਡੋ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਸ਼ਚਿਤ ਸਮੇਂ ਦੇ ਅੰਤਰਾਲਾਂ 'ਤੇ ਮਾਪੀ ਗਈ ਸੀ।ਇੱਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ, HeLa ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ 5 μg/ml ਐਕਟਿਨੋਮਾਈਸਿਨ ਡੀ (ਐਕਟ ਡੀ) ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ RNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤਿੰਨ ਗੁਣਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।(e) ਈ. ਕੋਲੀ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਸਾਰ ਪਰਖ।ਈ. ਕੋਲੀ ਦੇ ਵਾਧੇ ਦਾ OD600 ਮਾਪ ਕੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇੱਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ, ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ 50 μg/ml ਐਂਪਿਸਿਲਿਨ (Amp) ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੇ ਸੈੱਲ ਕੰਧ ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤਿੰਨ ਗੁਣਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।
ਯੂਰਾਮਾਈਡ-ਸਬੰਧਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਸਮਝਣ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਮੱਧਮ ਨਿਰੋਧਕ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਯੂਰਬੇਨਿਕ ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦਾ ਮੁੜ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਤਸਵੀਰ 'ਤੇ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 2b, 6a ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਉਰਮੋਟੋਨਿਕ ਐਸਿਡ 6 ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (200 μM) ਵਾਲੀਆਂ ਅਗਰ ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਪੌਦਿਆਂ ਨੇ ਛੋਟੀਆਂ ਅਤੇ ਖੱਬੇ-ਕਰਵ ਵਾਲੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ (θ = – 23.7 ± 6.1) ਪੈਦਾ ਕੀਤੀਆਂ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਨਿਯੰਤਰਣ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ, ਬੂਟੇ ਲਗਭਗ ਸਿੱਧੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰਦੇ ਹਨ (θ = – 3.8 ± 7.1)।ਇਸ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੇ ਤਿਰਛੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ 14,18 ਦੇ ਨਪੁੰਸਕਤਾ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਖੋਜ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ-ਅਸਥਿਰ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਦਵਾਈਆਂ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ ਅਤੇ ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ ਨੇ ਸਾਡੇ ਵਿਕਾਸ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ (ਅੰਜੀਰ 2b, 6a) ਦੇ ਅਧੀਨ ਸਮਾਨ ਰੂਟ ਝੁਕਾਅ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕੀਤਾ।ਉਸੇ ਸਮੇਂ, ਅਸੀਂ urmotonic acid ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਕਈਆਂ ਨੂੰ ਚੁਣਿਆ ਜੋ, ਕੁਝ ਖਾਸ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ, ਤਿਰਛੀ ਜੜ੍ਹ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਮਿਸ਼ਰਣ 8, 9, ਅਤੇ 15 ਨੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 75 μM, 50 μM, ਅਤੇ 40 μM 'ਤੇ ਰੂਟ ਵਿਕਾਸ ਦੀ ਦਿਸ਼ਾ ਨੂੰ ਬਦਲ ਦਿੱਤਾ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਮਿਸ਼ਰਣ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ (ਚਿੱਤਰ 2b, 6a) ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਅਸਥਿਰ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਅਸੀਂ ਘੱਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (15 µM) 'ਤੇ ਸਭ ਤੋਂ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ ursolic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ, KAND 11 ਦੀ ਵੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਪਾਇਆ ਕਿ KAND 11 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨੇ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ ਅਤੇ ਜੜ੍ਹ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦੀ ਦਿਸ਼ਾ ਅਸਮਾਨ ਸੀ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਉਹ ਖੱਬੇ ਪਾਸੇ ਢਲਾਣ ਵੱਲ ਝੁਕਦੇ ਸਨ ( ਚਿੱਤਰ C3)।.ਕਿਉਂਕਿ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ-ਅਸਥਿਰ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਦਵਾਈਆਂ ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਕਈ ਵਾਰ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਝੁਕਣ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਨ ਦੀ ਬਜਾਏ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਦੀ ਹੈ, ਅਸੀਂ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਇਸ ਸੰਭਾਵਨਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਕਿ KAND 11 ਰੂਟ ਐਪੀਡਰਮਲ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਨੂੰ ਦੇਖ ਕੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।25 μM KAND 11 ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਬੀਜਾਂ ਦੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਐਪੀਡਰਮਲ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀ-β-ਟਿਊਬਲਿਨ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇਮਯੂਨੋਹਿਸਟੋਕੈਮਿਸਟਰੀ ਨੇ ਐਲੋਗੇਸ਼ਨ ਜ਼ੋਨ (ਚਿੱਤਰ 6b) ਵਿੱਚ ਐਪੀਡਰਮਲ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ ਸਾਰੇ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਗਾਇਬ ਹੋਣ ਨੂੰ ਦਿਖਾਇਆ।ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਕੁਮਾਮੋਟੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਸਿੱਧੇ ਜਾਂ ਅਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਇਹ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਵਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਹਨ।
ਉਰਸੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਥਾਲੀਆਨਾ ਵਿੱਚ ਕੋਰਟੀਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਨੂੰ ਬਦਲਦੇ ਹਨ।(a) ਦਰਸਾਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ urmotonic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਮਾਪਿਆ ਰੂਟ ਝੁਕਾਅ ਕੋਣ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਜਾਣੇ ਜਾਂਦੇ ਦੋ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ: ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ ਅਤੇ ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ ਦਾ ਵੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਨਸੈੱਟ ਰੂਟ ਵਿਕਾਸ ਕੋਣ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਲਈ ਵਰਤੇ ਗਏ ਮਿਆਰ ਨੂੰ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਤਾਰੇ ਨਕਲੀ ਇਲਾਜ ਦੇ ਨਾਲ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ (ਟੀ ਟੈਸਟ, ਪੀ< 0.05)।n>19. ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 1 ਸੈ.ਮੀ.(b) ਲੰਬਕਾਰੀ ਜ਼ੋਨ ਵਿੱਚ ਐਪੀਡਰਮਲ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼।25 μM KAND 11 ਦੇ ਨਾਲ ਜਾਂ ਇਸ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ MS ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉੱਗਦੇ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸੀਸ ਕੋਲ ਜੜ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਨੂੰ β-ਟਿਊਬਲਿਨ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਅਤੇ ਅਲੈਕਸਾ ਫਲੋਰ-ਕਨਜੁਗੇਟਿਡ ਸੈਕੰਡਰੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇਮਯੂਨੋਹਿਸਟੋਕੈਮੀਕਲ ਸਟੈਨਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਕਲਪਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 10 µm।(c) ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਵਿੱਚ ਸੂਖਮ-ਟਿਊਬਾਂ ਦੀ ਮਾਈਟੋਟਿਕ ਬਣਤਰ।ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਨੂੰ ਇਮਯੂਨੋਹਿਸਟੋਕੈਮੀਕਲ ਸਟੈਨਿੰਗ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕਲਪਨਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਮਾਈਟੋਟਿਕ ਬਣਤਰ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਫੇਸ ਜ਼ੋਨ, ਸਪਿੰਡਲ ਅਤੇ ਫਰੈਗਮੋਪਲਾਸਟ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਨੂੰ ਕਨਫੋਕਲ ਚਿੱਤਰਾਂ ਤੋਂ ਗਿਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਤੀਰ ਮਾਈਟੋਟਿਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਬਣਤਰ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਤਾਰੇ ਨਕਲੀ ਇਲਾਜ ਦੇ ਨਾਲ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ (ਟੀ ਟੈਸਟ, ਪੀ< 0.05)।n>9. ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 50 µm।
ਹਾਲਾਂਕਿ ਉਰਸਾ ਵਿੱਚ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਫੰਕਸ਼ਨ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜਨ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਹੈ, ਇਸਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਦੀ ਵਿਧੀ ਆਮ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਡੀਪੋਲੀਮੇਰਾਈਜ਼ਿੰਗ ਏਜੰਟਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰੀ ਹੋਣ ਦੀ ਉਮੀਦ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਡੀਪੋਲੀਮੇਰਾਈਜ਼ਿੰਗ ਏਜੰਟ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ ਅਤੇ ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਐਪੀਡਰਮਲ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਐਨੀਸੋਟ੍ਰੋਪਿਕ ਵਿਸਤਾਰ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ KAND 11 ਅਜਿਹਾ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, KAND 11 ਅਤੇ disopyramide ਦੇ ਸਹਿ-ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਇੱਕ ਸੰਯੁਕਤ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਰੂਟ ਵਿਕਾਸ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਅਤੇ KAND 11-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ ਗਿਆ (ਚਿੱਤਰ S4)।ਅਸੀਂ KAND 11 ਨੂੰ ਹਾਈਪਰਸੈਂਸਟਿਵ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ 1-1 (phs1-1) ਮਿਊਟੈਂਟ ਦੇ ਜਵਾਬ ਦਾ ਵੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਹੈ। phs1-1 ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਗੈਰ-ਕੈਨੋਨੀਕਲ ਟਿਊਬਲਿਨ ਕਿਨੇਜ਼ ਪੁਆਇੰਟ ਮਿਊਟੇਸ਼ਨ ਹੈ ਅਤੇ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ 9,20 ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਜਾਣ 'ਤੇ ਛੋਟੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ।phs1-1 ਕਾਂਡ 11 ਵਾਲੇ ਅਗਰ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਡੀਸੋਪੀਰਾਮਿਡ (ਅੰਜੀਰ S5) 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਵਰਗੀਆਂ ਛੋਟੀਆਂ ਸਨ।
ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਸੀਂ KAND 11 ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਬੀਜਾਂ ਦੇ ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਵਿੱਚ ਮਾਈਟੋਟਿਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਬਣਤਰਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪ੍ਰੋਫੇਸ ਜ਼ੋਨ, ਸਪਿੰਡਲ ਅਤੇ ਫ੍ਰੈਗਮੋਪਲਾਸਟ ਦੇਖੇ। ਮਾਈਟੋਟਿਕ ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਦੇਖੀ ਗਈ ਸੀ (ਚਿੱਤਰ .6c)।
ਸਬਸੈਲੂਲਰ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ 'ਤੇ KAND 11 ਦੀ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਣ ਲਈ, ਅਸੀਂ KAND 11 ਨਾਲ ਤੰਬਾਕੂ BY-2 ਮੁਅੱਤਲ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਜਵਾਬ ਨੂੰ ਦੇਖਿਆ।ਅਸੀਂ ਪਹਿਲਾਂ KAND 11 ਨੂੰ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜੋ TagRFP-TUA6 ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਨੂੰ ਲੇਬਲ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਕੋਰਟੀਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਲਜ਼ 'ਤੇ KAND 11 ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ।ਚਿੱਤਰ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਕੋਰਟੀਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਘਣਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਸ ਨੇ ਸਾਈਟੋਪਲਾਸਮਿਕ ਪਿਕਸਲ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲੇਟਲ ਪਿਕਸਲ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤਤਾ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਸੀ।ਪਰਖ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ 1 ਘੰਟੇ ਲਈ 50 μM ਜਾਂ 100 μM KAND 11 ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਘਣਤਾ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 0.94 ± 0.74% ਜਾਂ 0.23 ± 0.28% ਤੱਕ ਘਟ ਗਈ, ਜਦੋਂ ਕਿ DMSO ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਘਣਤਾ, 1.4±1 ± 1.3.4. % (ਚਿੱਤਰ 7a)।ਇਹ ਨਤੀਜੇ Arabidopsis ਵਿੱਚ ਨਿਰੀਖਣ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਹਨ ਕਿ KAND 11 ਇਲਾਜ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਲਜ਼ (ਚਿੱਤਰ 6b) ਦੇ ਡੀਪੋਲੀਮੇਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਅਸੀਂ KAND 11 ਦੀ ਸਮਾਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ GFP-ABD-ਲੇਬਲ ਵਾਲੇ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਦੇ ਨਾਲ BY-2 ਲਾਈਨ ਦੀ ਵੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਦੇਖਿਆ ਕਿ KAND 11 ਦੇ ਇਲਾਜ ਨੇ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜ ਦਿੱਤਾ।1 ਘੰਟਾ ਲਈ 50 μM ਜਾਂ 100 μM KAND 11 ਦੇ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਨੇ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟ ਘਣਤਾ ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 1.20 ± 0.62% ਜਾਂ 0.61 ± 0.26% ਤੱਕ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ, ਜਦੋਂ ਕਿ DMSO-ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਘਣਤਾ 1.69% 0.5 ± 0.20% ਸੀ।7ਬੀ)ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰੋਪਾਈਜ਼ਾਮਾਈਡ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੇ ਉਲਟ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਲੈਟਰਨਕੁਲਿਨ ਬੀ, ਇੱਕ ਐਕਟਿਨ ਡੀਪੋਲੀਮੇਰਾਈਜ਼ਰ ਜੋ ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ (SI ਚਿੱਤਰ S6) ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ 1, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਐਸਿਡ 6, ਜਾਂ ਕੇਐਂਡ 11 ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਨੇ ਹੇਲਾ ਸੈੱਲਾਂ (ਐਸਆਈ ਚਿੱਤਰ S7) ਵਿੱਚ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, KAND 11 ਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਦੀ ਵਿਧੀ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਸਾਇਟੋਸਕਲੇਟਨ ਵਿਘਨਕਾਰਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰੀ ਮੰਨੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, KAND 11 ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਸਾਡੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪਿਕ ਨਿਰੀਖਣ ਨੇ KAND 11 ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੌਰਾਨ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਮੌਤ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ Evans ਨੀਲੇ-ਦਾਗ ਵਾਲੇ ਮਰੇ ਹੋਏ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਅਨੁਪਾਤ KAND 11 ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੇ 30 ਮਿੰਟ ਬਾਅਦ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨਹੀਂ ਵਧਿਆ, ਜਦੋਂ ਕਿ 50 μM ਜਾਂ 100 μM KAND ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਦੇ 90 ਮਿੰਟ ਬਾਅਦ, ਮਰੇ ਹੋਏ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 43.7% ਜਾਂ 80.1% ਤੱਕ ਵਧ ਗਈ (ਚਿੱਤਰ 7c)।ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ, ਇਹ ਅੰਕੜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਨਾਵਲ ursolic acid ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ KAND 11 ਇੱਕ ਪੌਦਾ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲਟਲ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਹੈ ਜਿਸਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਦੀ ਇੱਕ ਪਹਿਲਾਂ ਅਣਜਾਣ ਵਿਧੀ ਹੈ।
KAND ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼, ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ, ਅਤੇ ਤੰਬਾਕੂ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।(a) TagRFP-TUA6 ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਲਜ਼ ਦੀ ਵਿਜ਼ੂਅਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ।KAND 11 (50 μM ਜਾਂ 100 μM) ਜਾਂ DMSO ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਕਨਫੋਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।25 ਸੁਤੰਤਰ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਗ੍ਰਾਫਾਂ ਤੋਂ ਕੋਰਟੀਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਘਣਤਾ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਅੱਖਰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ (ਟੁਕੀ ਐਚਐਸਡੀ ਟੈਸਟ, ਪੀ< 0.05)।ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 10 µm।(b) BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਕੋਰਟੀਕਲ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ GFP-ABD2 ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਵਿਜ਼ੁਅਲ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।KAND 11 (50 μM ਜਾਂ 100 μM) ਜਾਂ DMSO ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਕਨਫੋਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਕੋਰਟੀਕਲ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਦੀ ਘਣਤਾ ਨੂੰ 25 ਸੁਤੰਤਰ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਗ੍ਰਾਫਾਂ ਤੋਂ ਗਿਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਅੱਖਰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ (ਟੁਕੀ ਐਚਐਸਡੀ ਟੈਸਟ, ਪੀ< 0.05)।ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 10 µm।(c) ਇਵਾਨਸ ਬਲੂ ਸਟੈਨਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਮਰੇ ਹੋਏ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਨਿਰੀਖਣ।KAND 11 (50 μM ਜਾਂ 100 μM) ਜਾਂ DMSO ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਬ੍ਰਾਈਟ-ਫੀਲਡ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।n=3।ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 100 µm।
ਨਵੇਂ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਖੋਜ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਨੇ ਦਵਾਈ ਅਤੇ ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਸਮੇਤ ਮਨੁੱਖੀ ਜੀਵਨ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪਹਿਲੂਆਂ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤਰੱਕੀ ਕੀਤੀ ਹੈ।ਕੁਦਰਤੀ ਸਰੋਤਾਂ ਤੋਂ ਲਾਭਦਾਇਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਇਤਿਹਾਸਕ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਐਕਟਿਨੋਮਾਈਸੀਟਸ ਨੂੰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸੈਕੰਡਰੀ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਐਵਰਮੇਕਟਿਨ, ਆਈਵਰਮੇਕਟਿਨ ਅਤੇ ਬਲੋਮਾਈਸਿਨ ਦਾ ਲੀਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਦੇ ਕਾਰਨ ਨੇਮੇਟੋਡਾਂ ਲਈ ਐਂਟੀਪੈਰਾਸੀਟਿਕ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕਸ ਵਜੋਂ ਲਾਭਦਾਇਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਇੱਕ ਐਂਟੀਕੈਂਸਰ ਏਜੰਟ 21,22 ਵਜੋਂ ਚਿਕਿਤਸਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਐਕਟਿਨੋਮਾਈਸੀਟਸ ਤੋਂ ਕਈ ਕਿਸਮ ਦੇ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਖੋਜੇ ਗਏ ਹਨ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਕੁਝ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਵਪਾਰਕ ਤੌਰ 'ਤੇ 1,23 ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਲਈ, ਲੋੜੀਂਦੀ ਜੈਵਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਕੁਦਰਤੀ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਲਈ ਐਕਟਿਨੋਮਾਈਸੀਟ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਇੱਕ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਰਣਨੀਤੀ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ S. werraensis ਤੋਂ ਇੱਕ ਨਵੇਂ ਮਿਸ਼ਰਣ, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ ਦੀ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਸਫਲਤਾਪੂਰਵਕ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ।Ursonic acid urbenamide ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦਾ ਇੱਕ ਸਿੰਥੈਟਿਕ ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ ਹੈ।ਇਹ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਕਰਲਿੰਗ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਮੱਧਮ ਤੋਂ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਿੱਧੇ ਜਾਂ ਅਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੌਦੇ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਲ ਨੂੰ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਯੂਰਮੋਟੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਦੀ ਵਿਧੀ ਮੌਜੂਦਾ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਨਾਲੋਂ ਵੱਖਰੀ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ KAND 11 ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਵੀ ਵਿਗਾੜਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ, ਇੱਕ ਰੈਗੂਲੇਟਰੀ ਵਿਧੀ ਦਾ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਦੁਆਰਾ urmotonic ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਸਾਈਟੋਸਕੇਲਟਲ ਢਾਂਚੇ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰਦੇ ਹਨ।.
urbenonic ਐਸਿਡ ਦੀ ਹੋਰ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ urbenonic ਐਸਿਡ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਸਮਝਣ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰੇਗੀ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਅਗਲਾ ਟੀਚਾ ਇਹ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕਿ ਕੀ ursonic ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਇਸ ਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਸਿੱਧੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਡੀਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਾਂ ਕੀ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਅਸਥਿਰਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ursonic ਐਸਿਡ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਜਿਹੇ ਮਾਮਲੇ ਵਿੱਚ ਜਿੱਥੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਸਿੱਧਾ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਨਹੀਂ ਹਨ, ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ 'ਤੇ ਕਿਰਿਆ ਦੇ ਸਥਾਨ ਅਤੇ ursonic ਐਸਿਡ ਦੇ ਅਣੂ ਟੀਚਿਆਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨਾ ਸਬੰਧਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਦੇ ਸੰਭਵ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨੂੰ ਹੋਰ ਸਮਝਣ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰੇਗਾ।ਸਾਡੀ ਬਾਇਓਐਕਟੀਵਿਟੀ ਜਾਂਚ ਨੇ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਥਾਲੀਆਨਾ, ਤੰਬਾਕੂ ਅਤੇ ਲਿਵਰਵਰਟ ਵਰਗੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਾਧੇ 'ਤੇ ursonic ਐਸਿਡ ਦੀ ਵਿਲੱਖਣ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਕ ਯੋਗਤਾ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਨਾ ਤਾਂ ਈ. ਕੋਲੀ ਅਤੇ ਨਾ ਹੀ ਹੇਲਾ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਹੋਏ ਸਨ।ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਲਈ ਥੋੜਾ ਜਾਂ ਕੋਈ ਜ਼ਹਿਰੀਲਾ ਹੋਣਾ ursonic ਐਸਿਡ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦਾ ਇੱਕ ਫਾਇਦਾ ਹੈ ਜੇਕਰ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਖੁੱਲੇ ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਖੇਤਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤਣ ਲਈ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਵਾਸਤਵ ਵਿੱਚ, ਕਿਉਂਕਿ ਯੂਕੇਰੀਓਟਸ ਵਿੱਚ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਆਮ ਬਣਤਰ ਹਨ, ਪੌਦਿਆਂ ਵਿੱਚ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਚੋਣਤਮਕ ਰੋਕਥਾਮ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਲਈ ਇੱਕ ਮੁੱਖ ਲੋੜ ਹੈ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਪ੍ਰੋਪਾਈਜ਼ਾਮਾਈਡ, ਇੱਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਡੀਪੋਲੀਮੇਰਾਈਜ਼ਿੰਗ ਏਜੰਟ ਜੋ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਟਿਊਬਲਿਨ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪੌਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ, ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਲਈ ਇਸਦੀ ਘੱਟ ਜ਼ਹਿਰੀਲੀ ਹੋਣ ਕਾਰਨ ਇੱਕ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ ਦੇ ਉਲਟ, ਸੰਬੰਧਿਤ ਬੈਂਜ਼ਾਮਾਈਡਜ਼ ਦੀਆਂ ਵੱਖੋ ਵੱਖਰੀਆਂ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ।ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, RH-4032 ਜਾਂ ਬੈਂਜੋਕਸਾਮਾਈਡ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਜਾਂ ਓਮੀਸੀਟਸ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਨੂੰ ਵੀ ਰੋਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਜ਼ਲੀਲਾਮਾਈਡ ਨੂੰ ਇਸਦੀ ਘੱਟ ਫਾਈਟੋਟੌਕਸਿਸਿਟੀ 25,26,27 ਕਾਰਨ ਇੱਕ ਉੱਲੀਨਾਸ਼ਕ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਨਵੇਂ ਖੋਜੇ ਗਏ ਰਿੱਛ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਚੋਣਵੇਂ ਸਾਈਟੋਟੌਕਸਿਟੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਇਹ ਧਿਆਨ ਦੇਣ ਯੋਗ ਹੈ ਕਿ ਹੋਰ ਸੋਧਾਂ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਟੀਚੇ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਬਦਲ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਸੰਭਾਵੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜਰਾਸੀਮ ਫੰਜਾਈ ਜਾਂ ਓਮੀਸਾਈਟਸ ਦੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਲਈ ਵਾਧੂ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ।
ਯੂਰਬੇਨੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੀਆਂ ਵਿਲੱਖਣ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਜੜੀ-ਬੂਟੀਆਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਅਤੇ ਖੋਜ ਸੰਦਾਂ ਵਜੋਂ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਉਪਯੋਗੀ ਹਨ।ਪੌਦੇ ਦੇ ਸੈੱਲ ਦੇ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਾਇਟੋਸਕਲੇਟਨ ਦੀ ਮਹੱਤਤਾ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਨਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਹੈ।ਪਹਿਲਾਂ ਦੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਪੌਦਿਆਂ ਨੇ ਮੋਰਫੋਜਨੇਸਿਸ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਗਤੀਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਕੇ ਕੋਰਟੀਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਸੰਗਠਨ ਦੀ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਵਿਧੀ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੀ ਹੈ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਨਿਯਮ ਲਈ ਜ਼ਿੰਮੇਵਾਰ ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਖੋਜ ਅਜੇ ਵੀ 3,4,28 ਜਾਰੀ ਹੈ।ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਗਤੀਸ਼ੀਲਤਾ ਦੀ ਸਾਡੀ ਮੌਜੂਦਾ ਸਮਝ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਸੰਗਠਨ ਦੀ ਵਿਧੀ ਦੀ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵਿਆਖਿਆ ਨਹੀਂ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ ਅਤੇ ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ ਦੋਵੇਂ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਨੂੰ ਡੀਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ ਗੰਭੀਰ ਜੜ੍ਹ ਵਿਗਾੜ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦੇ ਹਨ ਜਦੋਂ ਕਿ ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ ਦਾ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਹਲਕਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਟਿਊਬਲਿਨ ਵਿੱਚ ਪਰਿਵਰਤਨ, ਜੋ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜੜ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਡੈਕਸਟ੍ਰੋਰੋਟੇਸ਼ਨ ਦਾ ਕਾਰਨ ਵੀ ਬਣਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਪੈਕਲੀਟੈਕਸਲ, ਜੋ ਕਿ ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਗਤੀਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਵੀ ਸਥਿਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਜਿਹਾ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ।ਇਸ ਲਈ, ursolic ਐਸਿਡ ਦੇ ਅਣੂ ਟੀਚਿਆਂ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਅਤੇ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਨਾਲ ਪੌਦੇ ਦੇ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਨਿਯਮ ਵਿੱਚ ਨਵੀਂ ਸਮਝ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਨੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।ਇਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਰਸਾਇਣਾਂ ਦੀ ਭਵਿੱਖੀ ਤੁਲਨਾਵਾਂ ਜੋ ਵਿਗਾੜਿਤ ਵਿਕਾਸ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਡਿਸੋਪਾਈਰਾਮਾਈਡ, ਅਤੇ ਘੱਟ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਰਸਾਇਣ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਓਰੀਜ਼ਾਲਿਨ ਜਾਂ ਕੁਮਾਮੋਟੋਰਿਕ ਐਸਿਡ, ਇਸ ਗੱਲ ਦਾ ਸੁਰਾਗ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਨਗੇ ਕਿ ਵਿਗਾੜ ਵਿਕਾਸ ਕਿਵੇਂ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, ਰੱਖਿਆ-ਸਬੰਧਤ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲਟਲ ਪੁਨਰਗਠਨ ursonic ਐਸਿਡ ਦੀ cytotoxicity ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਹੋਰ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ.ਜਰਾਸੀਮ ਦੀ ਲਾਗ ਜਾਂ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਐਲੀਸੀਟਰ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਕਈ ਵਾਰ ਸਾਈਟੋਸਕੇਲਟਨ ਦੇ ਵਿਨਾਸ਼ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦੀ ਹੈ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਓਮੀਸੀਟ-ਪ੍ਰਾਪਤ ਕ੍ਰਿਪਟੌਕਸੈਂਥਿਨ ਨੂੰ ਤੰਬਾਕੂ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਅਤੇ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜਨ ਦੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ KAND ਇਲਾਜ30,31 ਨਾਲ ਵਾਪਰਦਾ ਹੈ।ursonic ਐਸਿਡ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਬਚਾਅ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਸੈਲੂਲਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਸਮਾਨਤਾਵਾਂ ਨੇ ਸਾਨੂੰ ਇਹ ਅਨੁਮਾਨ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਅਗਵਾਈ ਕੀਤੀ ਕਿ ਉਹ ਆਮ ਸੈਲੂਲਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਚਾਲੂ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਕ੍ਰਿਪਟੌਕਸੈਂਥਿਨ ਨਾਲੋਂ ursonic ਐਸਿਡ ਦਾ ਇੱਕ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​​​ਪ੍ਰਭਾਵ ਸਪੱਸ਼ਟ ਹੈ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਦਾ ਵਿਘਨ ਆਪਣੇ ਆਪ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਨੂੰ ਵਧਾਵਾ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਹਮੇਸ਼ਾ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਵਿਘਨ ਦੇ ਨਾਲ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹ ਦੇਖਣਾ ਬਾਕੀ ਹੈ ਕਿ ਕੀ ਜਰਾਸੀਮ ਜਾਂ ਇਲੀਸੀਟਰ ਵਿਗਾੜਿਤ ਜੜ੍ਹ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ursonic acid ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਰੱਖਿਆ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਸਾਇਟੋਸਕਲੀਟਨ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਵਾਲਾ ਅਣੂ ਗਿਆਨ ਇੱਕ ਆਕਰਸ਼ਕ ਸਮੱਸਿਆ ਹੈ ਜਿਸ ਨੂੰ ਹੱਲ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ursonic acid ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਘੱਟ ਅਣੂ ਭਾਰ ਵਾਲੇ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਦਾ ਸ਼ੋਸ਼ਣ ਕਰਕੇ, ਨਾਲ ਹੀ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੀਆਂ ਸ਼ਕਤੀਆਂ ਵਾਲੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼ ਦੀ ਇੱਕ ਸ਼੍ਰੇਣੀ, ਉਹ ਅਣਜਾਣ ਸੈਲੂਲਰ ਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਉਣ ਦੇ ਮੌਕੇ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ, ਨਵੇਂ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੀ ਖੋਜ ਅਤੇ ਉਪਯੋਗ ਜੋ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਗਤੀਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਮੋਡਿਊਲੇਟ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਪੌਦੇ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਆਕਾਰ ਦੇ ਨਿਰਧਾਰਨ ਦੇ ਅਧੀਨ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਅਣੂ ਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਹੱਲ ਕਰਨ ਲਈ ਸ਼ਕਤੀਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਨਗੇ।ਇਸ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ, ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਮਿਸ਼ਰਤ urmotonic ਐਸਿਡ, ਜੋ ਕਿ ਮਾਈਕਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਅਤੇ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਹੋਰ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿਚਕਾਰ ਸਬੰਧ ਨੂੰ ਸਮਝਣ ਦਾ ਮੌਕਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਯੂਰਬੇਨੋਨਿਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਰਸਾਇਣਕ ਅਤੇ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਸਾਨੂੰ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲਟਨ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਅਣੂ ਨਿਯੰਤ੍ਰਕ ਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਸਮਝਣ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰੇਗਾ।
S. werraensis MK493-CF1 ਨੂੰ ਇੱਕ 500 ਮਿ.ਲੀ. ਬੇਫਲਡ ਏਰਲੇਨਮੇਅਰ ਫਲਾਸਕ ਵਿੱਚ ਟੀਕਾ ਲਗਾਓ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 110 ਮਿ.ਲੀ. ਬੀਜ ਮਾਧਿਅਮ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 2% (w/v) ਗਲੈਕਟੋਜ਼, 2% (w/v) ਐਸੇਂਸ ਪੇਸਟ, 1% (w/v) ਬੈਕਟੋ ਰਚਨਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ। .-ਸੋਇਟਨ (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ, ਇੰਕ.), 0.5% (ਡਬਲਯੂ/ਵੀ) ਮੱਕੀ ਦੇ ਐਬਸਟਰੈਕਟ (ਕੋਗੋਸਟਚ ਕੰ., ਲਿਮਟਿਡ, ਜਾਪਾਨ), 0.2% (ਡਬਲਯੂ/ਵੀ) (ਐਨਐਚ4)2SO4 ਅਤੇ 0.2% CaCO3 ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ।(ਨਸਬੰਦੀ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ pH 7.4)।ਬੀਜ ਕਲਚਰ ਨੂੰ ਰੋਟਰੀ ਸ਼ੇਕਰ (180 rpm) 'ਤੇ 27 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 2 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਠੋਸ ਅਵਸਥਾ ਦੇ ਫਰਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਉਤਪਾਦਨ ਦੀ ਕਾਸ਼ਤ।ਬੀਜ ਕਲਚਰ (7 ਮਿ.ਲੀ.) ਨੂੰ ਇੱਕ 500 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਕੇ-1 ਫਲਾਸਕ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 40 ਗ੍ਰਾਮ ਉਤਪਾਦਨ ਮਾਧਿਅਮ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 15 ਗ੍ਰਾਮ ਪ੍ਰੈੱਸਡ ਜੌਂ (ਮਯੂਐਸਓ ਕੰਪਨੀ, ਲਿਮਟਿਡ, ਜਾਪਾਨ) ਅਤੇ 25 ਗ੍ਰਾਮ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ (ਪੀਐਚ ਨੂੰ ਐਡਜਸਟ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਨਸਬੰਦੀ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ).).ਫਰਮੈਂਟੇਸ਼ਨ 14 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ 30 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੇ ​​ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਫਰਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ 40 ਮਿਲੀਲੀਟਰ/ਬੋਤਲ EtOH ਅਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜਡ (1500 g, 4°C, 10 ਮਿੰਟ) ਨਾਲ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਕਲਚਰ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ (60 ਮਿ.ਲੀ.) ਨੂੰ 10% MeOH/EtOAc ਦੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨਾਲ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਜੈਵਿਕ ਪਰਤ ਨੂੰ ਇੱਕ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ (59.5 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਘੱਟ ਦਬਾਅ ਹੇਠ ਭਾਫ਼ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ ਕਿ ਇੱਕ ਉਲਟ ਪੜਾਅ ਕਾਲਮ (ਸ਼ੀਸੀਡੋ ਕੈਪਸੈਲ PAK C18 UG120, 5 μm, ID) 'ਤੇ ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਇਲੂਸ਼ਨ (0-10 ਮਿੰਟ: 90%) ਦੇ ਨਾਲ HPLC ਦੇ ਅਧੀਨ ਸੀ। 10 mm × ਲੰਬਾਈ 250 mm) H2O/CH3CN, 10–35 ਮਿੰਟ: 90% H2O/CH3CN ਤੋਂ 70% H2O/CH3CN (ਗ੍ਰੇਡੀਐਂਟ), 35–45 ਮਿੰਟ: 90% H2O/EtOH, 45–155 ਮਿੰਟ: 90% HO /EtOH ਤੋਂ 100% EtOH (ਗਰੇਡੀਐਂਟ (ਗ੍ਰੇਡੀਐਂਟ), 155-200 ਮਿੰਟ: 100% EtOH) 1.5 ਮਿਲੀਲੀਟਰ/ਮਿੰਟ ਦੀ ਵਹਾਅ ਦਰ 'ਤੇ, ਕੂਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ (1, 36.0 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ) ਨੂੰ ਇੱਕ ਸਫੈਦ ਅਮੋਰਫਸ ਪਾਊਡਰ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਕੁਮਾਮੋਟੋਆਮਾਈਡ (1);1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.93 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 4.3, 1.8 Hz 1H), 6.05 (t, J = 3.8 Hz, 1H)।, 4.08 (s, 3H);13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ 161.1, 121.0, 119.9, 112.2, 105.0, 68.3;ESI-HRMS [M+H]+: [C6H9N2O2]+ ਗਣਿਤ ਮੁੱਲ: 141.0659, ਮਾਪਿਆ ਮੁੱਲ: 141.0663, IR νmax 3451, 3414, 3173, 2938, 1603, 1593, 1573, 1573cm।
ਕੋਲੰਬੀਆ ਦੇ ਬੀਜ (ਕੋਲ-0) ਖੋਜ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਬਾਇਓਲਾਜੀਕਲ ਰਿਸੋਰਸ ਸੈਂਟਰ (ਏ.ਬੀ.ਆਰ.ਸੀ.) ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।Col-0 ਬੀਜਾਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰ ਅਤੇ ਸਾਡੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਰੱਖ-ਰਖਾਅ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਜੰਗਲੀ ਕਿਸਮ ਦੇ ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਪੌਦਿਆਂ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਦੇ ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ 2% ਸੁਕਰੋਜ਼ (ਫੂਜੀਫਿਲਮ ਵਾਕੋ ਪਿਓਰ ਕੈਮੀਕਲ), 0.05% (ਡਬਲਯੂ/ਵੀ) 2- (4-ਮੋਰਫੋਲੀਨੋ) ਈਥੇਨੇਸਲਫੋਨਿਕ ਐਸਿਡ (ਐਮਈਐਸ) (ਫੂਜੀਫਿਲਮ ਵਾਕੋ ਪਯੂਰ ਚੇਅ) ਵਾਲੇ ਅੱਧ-ਸ਼ਕਤੀ ਵਾਲੇ ਮੁਰਸ਼ੀਗੇ ਅਤੇ ਸਕੂਗ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਸਤਹੀ ਨਿਰਜੀਵ ਅਤੇ ਸੰਸਕ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ).) ਅਤੇ 1.5% ਅਗਰ (ਫੂਜੀਫਿਲਮ ਵਾਕੋ ਪਿਓਰ ਕੈਮੀਕਲ), pH 5.7, 23 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਅਤੇ ਨਿਰੰਤਰ ਰੌਸ਼ਨੀ।phs1-1 ਮਿਊਟੈਂਟ ਦੇ ਬੀਜ ਟੀ. ਹਾਸ਼ੀਮੋਟੋ (ਨਾਰਾ ਇੰਸਟੀਚਿਊਟ ਆਫ਼ ਸਾਇੰਸ ਐਂਡ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ) ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।
ਸਟ੍ਰੇਨ SR-1 ਦੇ ਬੀਜ ਟੀ. ਹਾਸ਼ੀਮੋਟੋ (ਨਾਰਾ ਇੰਸਟੀਚਿਊਟ ਆਫ਼ ਸਾਇੰਸ ਐਂਡ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ) ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ ਜੰਗਲੀ ਕਿਸਮ ਦੇ ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਵਜੋਂ ਵਰਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ ਸਤ੍ਹਾ ਤੋਂ ਨਿਰਜੀਵ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ ਉਗਣ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿੰਨ ਰਾਤਾਂ ਲਈ ਨਿਰਜੀਵ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਭਿੱਜਿਆ ਗਿਆ, ਫਿਰ 2% ਸੁਕਰੋਜ਼, 0.05% (ਡਬਲਯੂ/ਵੀ) MES, ਅਤੇ 0.8% ਜੈਲਨ ਗਮ (ਫੂਜੀਫਿਲਮ ਵਾਕੋ ਸ਼ੁੱਧ ਰਸਾਇਣਕ) ਵਾਲੇ ਅੱਧੇ-ਸ਼ਕਤੀ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ। ਮੁਰਸ਼ਿਗੇ।ਅਤੇ ਸਕੂਗ ਮਾਧਿਅਮ) pH 5.7 ਦੇ ਨਾਲ ਅਤੇ ਲਗਾਤਾਰ ਰੋਸ਼ਨੀ ਵਿੱਚ 23°C 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਸਟ੍ਰੇਨ ਟਾਕ-1 ਨੂੰ ਟੀ. ਕੋਹਚੀ (ਕਿਓਟੋ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ) ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਲਿਵਰਵਰਟ ਅਧਿਐਨ ਲਈ ਮਿਆਰੀ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਇਕਾਈ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਜੇਮਾ ਨੂੰ ਨਿਰਜੀਵ ਸੰਸਕ੍ਰਿਤ ਪੌਦਿਆਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਫਿਰ 1% ਸੁਕਰੋਜ਼ ਅਤੇ 0.3% ਜੈਲਨ ਗਮ ਵਾਲੇ ਗੈਂਬੋਰਗ ਬੀ 5 ਮਾਧਿਅਮ (ਫੂਜੀਫਿਲਮ ਵਾਕੋ ਪਿਓਰ ਕੈਮੀਕਲ) ਉੱਤੇ ਪਲੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਲਗਾਤਾਰ ਰੋਸ਼ਨੀ ਵਿੱਚ 23 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਤੰਬਾਕੂ BY-2 ਸੈੱਲ (Nicotiana tabacum L. cv. Bright Yellow 2) S. Hasezawa (ਟੋਕੀਓ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ) ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸੰਸ਼ੋਧਿਤ ਲਿੰਸਮੀਅਰ ਅਤੇ ਸਕੂਗ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ 95-ਗੁਣਾ ਪੇਤਲਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ 2,4-ਡਾਈਕਲੋਰੋਫੇਨੋਕਸਿਆਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ 32 ਨਾਲ ਹਫਤਾਵਾਰੀ ਪੂਰਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੈੱਲ ਮੁਅੱਤਲ ਨੂੰ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ 27°C 'ਤੇ 130 rpm 'ਤੇ ਰੋਟਰੀ ਸ਼ੇਕਰ 'ਤੇ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਤਾਜ਼ੇ ਮਾਧਿਅਮ ਦੇ 10 ਗੁਣਾ ਵਾਲੀਅਮ ਨਾਲ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਧੋਵੋ ਅਤੇ ਉਸੇ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਮੁੜ ਸਸਪੈਂਡ ਕਰੋ।ਗੋਭੀ ਮੋਜ਼ੇਕ ਵਾਇਰਸ 35S ਪ੍ਰਮੋਟਰ ਦੇ ਤਹਿਤ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲ ਮਾਰਕਰ TagRFP-TUA6 ਜਾਂ ਐਕਟਿਨ ਫਿਲਾਮੈਂਟ ਮਾਰਕਰ GFP-ABD2 ਨੂੰ ਸਥਿਰਤਾ ਨਾਲ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ BY-2 ਟ੍ਰਾਂਸਜੇਨਿਕ ਸੈੱਲ ਲਾਈਨਾਂ 33,34,35 ਦੇ ਵਰਣਨ ਅਨੁਸਾਰ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਸਨ।ਇਹਨਾਂ ਸੈੱਲ ਲਾਈਨਾਂ ਨੂੰ ਅਸਲ BY-2 ਸੈੱਲ ਲਾਈਨ ਲਈ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਬਣਾਈ ਰੱਖਿਆ ਅਤੇ ਸਮਕਾਲੀ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
HeLa ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਡੁਲਬੇਕੋ ਦੇ ਸੋਧੇ ਹੋਏ ਈਗਲਜ਼ ਮਾਧਿਅਮ (DMEM) (ਲਾਈਫ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ) ਵਿੱਚ 10% ਭਰੂਣ ਬੋਵਾਈਨ ਸੀਰਮ, 1.2 U/ml ਪੈਨਿਸਿਲਿਨ, ਅਤੇ 1.2 μg/ml ਸਟ੍ਰੈਪਟੋਮਾਈਸਿਨ ਨਾਲ ਇੱਕ 37° C %2 ਦੇ ਨਾਲ ਇਨਕਿਊਬੇਟਰ ਵਿੱਚ ਪੂਰਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਇਸ ਖਰੜੇ ਵਿੱਚ ਵਰਣਿਤ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਜਾਪਾਨੀ ਜੀਵ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨਿਯਮਾਂ ਅਤੇ ਦਿਸ਼ਾ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।
ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਸਟਾਕ ਹੱਲ ਵਜੋਂ ਡਾਈਮੇਥਾਈਲ ਸਲਫੌਕਸਾਈਡ (ਡੀਐਮਐਸਓ; ਫੁਜੀਫਿਲਮ ਵਾਕੋ ਸ਼ੁੱਧ ਰਸਾਇਣਕ) ਵਿੱਚ ਭੰਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਲਈ ਐਮਐਸ ਮਾਧਿਅਮ ਅਤੇ ਤੰਬਾਕੂ ਜਾਂ ਲਿਵਰਵਰਟ ਲਈ ਗੈਂਬੋਰਗ ਬੀ5 ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਜੜ੍ਹ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ, ਪ੍ਰਤੀ ਪਲੇਟ ਵਿੱਚ 10 ਤੋਂ ਵੱਧ ਬੀਜ ਅਗਰ ਮਾਧਿਅਮ ਉੱਤੇ ਬੀਜੇ ਗਏ ਸਨ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸੰਕੇਤਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਜਾਂ DMSO ਸ਼ਾਮਲ ਸਨ।ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ 7 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਵਿਕਾਸ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਬੂਟਿਆਂ ਦੀ ਫੋਟੋ ਖਿੱਚੀ ਗਈ ਅਤੇ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਮਾਪੀ ਗਈ।ਅਰਾਬੀਡੋਪਸਿਸ ਦੇ ਉਗਣ ਲਈ, 200 μM ਮਿਸ਼ਰਣ ਜਾਂ DMSO ਵਾਲੇ ਅਗਰ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਪ੍ਰਤੀ ਪਲੇਟ 48 ਬੀਜ ਬੀਜੇ ਗਏ ਸਨ।ਅਰਬੀਡੋਪਸਿਸ ਦੇ ਬੀਜ ਇੱਕ ਵਿਕਾਸ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ ਉਗਣ ਵਾਲੇ ਬੂਟਿਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਉਗਣ (ਡੇਗ) ਤੋਂ 7 ਦਿਨਾਂ ਬਾਅਦ ਗਿਣੀ ਗਈ ਸੀ।ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਉਗਣ ਲਈ, 24 ਬੀਜ ਪ੍ਰਤੀ ਪਲੇਟ ਅਗਰ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਬੀਜੇ ਗਏ ਸਨ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 200 μM KAND ਜਾਂ DMSO ਸੀ।ਤੰਬਾਕੂ ਦੇ ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਗ੍ਰੋਥ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਉਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਸੀ ਅਤੇ 14 ਦਿਨਾਂ ਬਾਅਦ ਉਗਣ ਵਾਲੇ ਬੂਟਿਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਸੀ।ਲਿਵਰਵਰਟ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ, ਹਰੇਕ ਪਲੇਟ ਤੋਂ 9 ਭਰੂਣਾਂ ਨੂੰ ਅਗਰ ਮਾਧਿਅਮ 'ਤੇ ਪਲੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਜਿਸ ਵਿੱਚ KAND ਜਾਂ DMSO ਦੇ ਸੰਕੇਤ ਦਿੱਤੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ 14 ਦਿਨਾਂ ਲਈ ਇੱਕ ਗ੍ਰੋਥ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।
ਰੂਟ ਮੈਰੀਸਟਮ ਸੰਗਠਨ ਦੀ ਕਲਪਨਾ ਕਰਨ ਲਈ 5 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ/ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (PI) ਨਾਲ ਰੰਗੇ ਹੋਏ ਬੀਜਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।PI ਸਿਗਨਲਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ TCS SPE ਕਨਫੋਕਲ ਲੇਜ਼ਰ ਸਕੈਨਿੰਗ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ (ਲੀਕਾ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਿਸਟਮ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਦੁਆਰਾ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
β-glucuronidase (GUS) ਦੇ ਨਾਲ ਜੜ੍ਹਾਂ ਦੇ ਹਿਸਟੋਕੈਮੀਕਲ ਧੱਬੇ ਮਲਾਮੀ ਅਤੇ ਬੇਨਫੇ 36 ਦੁਆਰਾ ਦੱਸੇ ਗਏ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਬੀਜਾਂ ਨੂੰ ਰਾਤੋ ਰਾਤ 90% ਐਸੀਟੋਨ ਵਿੱਚ ਫਿਕਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, GUS ਬਫਰ ਵਿੱਚ 0.5 mg/ml 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-d-glucuronic acid ਨਾਲ 1 ਘੰਟੇ ਲਈ ਦਾਗਿਆ ਗਿਆ ਅਤੇ ਇੱਕ ਹਾਈਡਰੇਟਿਡ ਕਲੋਰਲਡੀਹਾਈਡ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ।(8 ਗ੍ਰਾਮ ਕਲੋਰਲ ਹਾਈਡਰੇਟ, 2 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਪਾਣੀ ਅਤੇ 1 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਗਲਾਈਸਰੋਲ) ਅਤੇ ਐਕਸੀਓ ਇਮੇਜਰ M1 ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ (ਕਾਰਲ ਜ਼ੀਸ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਵਿਭਿੰਨ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਕੰਟਰਾਸਟ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਦੁਆਰਾ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ।
ਰੂਟ ਐਂਗਲਾਂ ਨੂੰ ਲੰਬਕਾਰੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰੱਖੀਆਂ ਪਲੇਟਾਂ 'ਤੇ ਉਗਾਈਆਂ ਗਈਆਂ 7-ਦਿਨ ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਪੌਦਿਆਂ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਰੂਟ ਦੇ ਕੋਣ ਨੂੰ ਗ੍ਰੈਵਿਟੀ ਵੈਕਟਰ ਦੀ ਦਿਸ਼ਾ ਤੋਂ ਮਾਪੋ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਕਦਮ 6 ਵਿੱਚ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਹੈ।
ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ 37 ਵਿੱਚ ਮਾਮੂਲੀ ਸੋਧਾਂ ਦੇ ਨਾਲ, ਵਰਣਨ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕਾਰਟਿਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਿਊਬਿਊਲਸ ਦੀ ਵਿਵਸਥਾ ਨੂੰ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਐਂਟੀ-β-ਟਿਊਬਲਿਨ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ (KMX-1, ਮਰਕ ਮਿਲੀਪੋਰ: MAB3408) ਅਤੇ ਅਲੈਕਸਾ ਫਲੋਰ 488-ਕਨਜੁਗੇਟਿਡ ਐਂਟੀ-ਮਾਊਸ IgG (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ: A32723) ਨੂੰ 1:1000 ਅਤੇ 1:100 ਡਾਇਲਿਊਸ਼ਨ 'ਤੇ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਅਤੇ ਸੈਕੰਡਰੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਕ੍ਰਮਵਾਰ.ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਚਿੱਤਰਾਂ ਨੂੰ ਟੀਸੀਐਸ ਐਸਪੀਈ ਕਨਫੋਕਲ ਲੇਜ਼ਰ ਸਕੈਨਿੰਗ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ (ਲੀਕਾ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਿਸਟਮ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।Z-ਸਟੈਕ ਚਿੱਤਰਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰੋ ਅਤੇ ਨਿਰਮਾਤਾ ਦੀਆਂ ਹਦਾਇਤਾਂ ਅਨੁਸਾਰ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਤੀਬਰਤਾ ਦੇ ਅਨੁਮਾਨ ਬਣਾਓ।
ਹੇਲਾ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਪਰਖ ਨਿਰਮਾਤਾ ਦੀਆਂ ਹਦਾਇਤਾਂ ਅਨੁਸਾਰ ਸੈੱਲ ਕਾਉਂਟਿੰਗ ਕਿੱਟ 8 (ਡੋਜਿੰਡੋ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
E. coli DH5α ਦੇ ਵਾਧੇ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ 600 nm (OD600) 'ਤੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਸੱਭਿਆਚਾਰ ਵਿੱਚ ਸੈੱਲ ਘਣਤਾ ਨੂੰ ਮਾਪ ਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
CSU-X1 ਕਨਫੋਕਲ ਸਕੈਨਿੰਗ ਯੰਤਰ (ਯੋਕੋਗਾਵਾ) ਅਤੇ ਇੱਕ sCMOS ਕੈਮਰਾ (ਜ਼ਾਈਲਾ, ਐਂਡੋਰ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ) ਨਾਲ ਲੈਸ ਇੱਕ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਮਾਈਕਰੋਸਕੋਪ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਟ੍ਰਾਂਸਜੇਨਿਕ BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲੇਟਲ ਸੰਗਠਨ ਨੂੰ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਾਈਟੋਸਕੇਲਟਲ ਘਣਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਚਿੱਤਰ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਸ ਨੇ 38,39 ਦੇ ਵਰਣਨ ਅਨੁਸਾਰ ਚਿੱਤਰਜੇ ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਕਨਫੋਕਲ ਚਿੱਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਸਾਈਟੋਪਲਾਸਮਿਕ ਪਿਕਸਲ ਵਿੱਚ ਸਾਇਟੋਸਕੇਲੇਟਲ ਪਿਕਸਲ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤਤਾ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਸੀ।
BY-2 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸੈੱਲ ਦੀ ਮੌਤ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ, ਸੈੱਲ ਸਸਪੈਂਸ਼ਨ ਦੇ ਇੱਕ ਅਲੀਕੋਟ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 0.05% ਇਵਾਨਸ ਨੀਲੇ ਨਾਲ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਮਰੇ ਹੋਏ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਚੋਣਵੇਂ ਇਵਾਨਸ ਨੀਲਾ ਧੱਬਾ ਬਰਕਰਾਰ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਝਿੱਲੀ 40 ਦੁਆਰਾ ਵਿਹਾਰਕ ਸੈੱਲਾਂ ਤੋਂ ਡਾਈ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢਣ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਇੱਕ ਚਮਕਦਾਰ-ਫੀਲਡ ਮਾਈਕਰੋਸਕੋਪ (BX53, ਓਲੰਪਸ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਦਾਗ ਵਾਲੇ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
37°C ਅਤੇ 5% CO2 'ਤੇ ਨਮੀ ਵਾਲੇ ਇਨਕਿਊਬੇਟਰ ਵਿੱਚ 10% FBS ਦੇ ਨਾਲ DMEM ਪੂਰਕ ਵਿੱਚ HeLa ਸੈੱਲ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ।ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਇਲਾਜ 100 μM KAND 11, ਕੁਮਾਮੋਨਾਮਿਕ ਐਸਿਡ 6, ਕੁਮਾਮੋਨਾਮਾਈਡ 1, 100 ng/ml colcemid (Gibco), ਜਾਂ 100 ng/ml Nocodmaze (Sigma) ਨਾਲ 37°C 'ਤੇ 6 ਘੰਟੇ ਲਈ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ MetOH ਅਤੇ ਫਿਰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਐਸੀਟੇਟ ਨਾਲ ਫਿਕਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਥਿਰ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ β-ਟਿਊਬਲਿਨ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀ (1D4A4, ਪ੍ਰੋਟੀਨਟੈਕ: 66240-1) 0.5% BSA/PBS ਵਿੱਚ 2 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਪਤਲਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, TBST ਨਾਲ 3 ਵਾਰ ਧੋਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਅਲੈਕਸਾ ਫਲੋਰ ਬੱਕਰੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।488 1 ਘੰਟਾ- ਮਾਊਸ IgG (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਵਿਗਿਆਨਕ: A11001) ਅਤੇ 15 ng/ml 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 0.5% BSA/PBS ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।TBST ਨਾਲ ਤਿੰਨ ਵਾਰ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਿਕੋਨ ਇਕਲਿਪਸ Ti-E ਉਲਟ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ 'ਤੇ ਦਾਗ ਵਾਲੇ ਸੈੱਲ ਦੇਖੇ ਗਏ ਸਨ।ਚਿੱਤਰਾਂ ਨੂੰ ਮੇਟਾਮੋਰਫ ਸੌਫਟਵੇਅਰ (ਮੌਲੀਕਿਊਲਰ ਡਿਵਾਈਸਿਸ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਠੰਡਾ ਹਮਾਮਤਸੂ ORCA-R2 CCD ਕੈਮਰੇ ਨਾਲ ਕੈਪਚਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।